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cul5基因文献资料
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Cul5基因抑制卵巢癌细胞生长
目的 观察cullin5 (culS)基因对OVCAR3细胞生长活性和增殖的影响.方法 构建cul5的过表达和敲降质粒.用Western印迹检测质粒的有效性.用MTT和集落形成实验检测cul5对OVCAR3细胞增殖的影响.结果 酶切和测序鉴定表明质粒构建成功.实验表明,过表达cul5能够抑制OVCAR3细胞的生长活性和集落形成率,敲降cul5能够增强OVCAR3细胞的生长活性和集落形成率.结论 cul5在卵巢癌中起到抑癌基因的作用.
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CUL5基因的RNA干扰真核表达载体的构建
目的:构建CUL5基因的RNA干扰真核表达载体,探索CUL5在鼻咽癌放射治疗中加速再增殖的作用.方法: 根据 GenBank数据库提供的 CUL5基因mRNA序列,按照Tuschl 设计原则,设计选择双链小干扰RNA( small interfering RNA,siRNA ) ,再设计合成为能表达其小发卡结构RNA(small hairpin RNAs,shRNA)的DNA序列,并与pGPU6/GFP/Neo质粒定向连接,构建真核表达载体,并进行限制性内切酶酶切和DNA测序鉴定.结果: 经限制性内切酶酶切和DNA测序证实质粒中插入的为所需序列,通过RT-PCR证实其能够干扰CNE2细胞的CUL5基因表达.结论: CUL5基因RNA干扰真核细胞表达载体的构建成功.
