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RPS7基因文献资料
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稳定干扰核糖体蛋白RPS7基因表达的宫颈癌HeLa细胞株的建立
目的 建立稳定抑制RPS7基因表达的宫颈癌HeLa细胞株.方法 设计并合成靶向人RPS7基因的shRNA寡核苷酸片段,克隆到逆转录病毒载体pSIREN中,构建重组质粒pSIREN-RPS7-shRNA,转染293T细胞,将包装产生的重组逆转录病毒感染宫颈癌HeLa细胞,经嘌呤霉素筛选获得稳定的细胞克隆,用real-time PCR和Western印迹检测细胞中RPS7 mRNA和蛋白表达水平.结果 获得了经测序鉴定正确的重组逆转录病毒质粒,逆转录病毒感染HeLa细胞后用嘌呤霉素筛选出的稳定细胞中,RPS7 mRNA和蛋白水平均显著低于干扰对照细胞.结论 成功构建了靶向人RPS7基因的shRNA逆转录病毒载体,建立了稳定抑制RPS7基因表达的宫颈癌HeLa细胞株,为进一步研究RPS7在宫颈癌中的生物学功能和作用机制提供了可靠的细胞模型.
