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翻译增强序列文献资料
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含翻译增强序列的人canstatin杜氏盐藻叶绿体表达载体的构建
目的：构建含翻译增强序列的人canstatin杜氏盐藻叶绿体重组表达载体。方法：采用RTP-CR 的方法，获得含有人canstatin 的cDNA片段以及分别在5’UTR下游和3’UTR上游添加了翻译增强序列（ UUAACUUUA）的人canstatin cDNA 片段，将得到的目的片段分别连接到PMD18-T载体上，利用该载体将目的片段连接到荧光素酶基因Lux Ct表达盒中并进行酶切鉴定。结果：RT-PCR分别得到约700 bp的cDNA片段并克隆到PMD18-T载体上。用PaeR7Ⅰ、SphⅠ双酶切 Lux Ct质粒，得到2100 bp和10000 bp 的2条片段。然后，将大片段回收后分别与上一步得到的cDNA片段进行连接，酶切鉴定结果显示含有翻译增强序列的人canstatin 片段成功插入到Lux Ct质粒中。结论：成功构建了含有翻译增强序列的人canstatin杜氏盐藻叶绿体重组表达载体。
