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重组人Ⅲ型胶原基组织工程角膜植入兔眼生物相容性研究
背景 组织工程角膜由于更接近活体角膜形态,植入体内易于成活而成为当今眼科学关注的热点.目的 探讨组织工程角膜重组人Ⅲ型胶原(RHC-Ⅲ)/聚[3-(甲基丙烯酰胺)丙基—二甲基(3-磺丙)胺] (PMPDSAH)互穿聚合物网络(IPN)(RHC-Ⅲ/PMPDSAH IPN)水凝胶植入兔眼的生物相容性及其作为角膜替代物的可行性.方法 中国大耳白兔108只按照随机数字表法分为2个组,实验组90只,正常对照组3只,其他15只兔(30只眼)为同种异体移植组提供供体角膜.实验组根据角膜材料的不同分为RHC-Ⅲ/PMPDSAH IPN组、负载神经生长因子(NGF)的NGF RHC-Ⅲ/PMPDSAH IPN组和同种异体移植组,每组各30只兔,均取右眼为手术眼.将实验组3种材料移植入兔角膜前板层,术后裂隙灯下观察有无排斥反应,对角膜透明度、角膜新生血管(CNV)的变化进行评分,记录各组兔术眼角膜上皮化时间,观察期为6个月.分别于术后3d、1周、2周及术后1、3、6个月每组各取5只兔角膜行苏木精—伊红染色,术后6个月采用免疫组织化学法检测角膜上皮细胞特异性标志蛋白角蛋白K3的表达.对实验组3个亚组各时间点角膜透明度和CNV评分的差异比较进行多组独立样本的Kraskal-WallisH检验,3个亚组角膜上皮化时间比较采用单因素方差分析及LSD-t检验.结果 实验的6个月中,RHC-Ⅲ/PMPDSAH IPN组、NGF RHC-Ⅲ/PMPDSAH IPN组和同种异体移植组兔术眼的植片均未脱出,未见免疫排斥反应.术后6个月,RHC-Ⅲ/PMPDSAH IPN组、NGFRHC-Ⅲ/PMPDSAH IPN组和同种异体移植组角膜透明度、CNV与正常对照组比较差异均无统计学意义(H=4.34,P=0.23;H=2.60,P=0.46).NGF RHC-Ⅲ/PMPDSAH IPN组角膜上皮化时间短,平均为(4.97±0.63)d,与RHC-Ⅲ/PMPDSAH IPN组和同种异体移植组比较差异均有统计学意义(t=11.97,P=0.00；t=5.80,P=0.00)；RHC-Ⅲ/PMPDSAH IPN组和同种异体移植组比较差异有统计学意义(t=6.32,P=0.00).RHC-Ⅲ/PMPDSAH IPN组和NGF RHC-Ⅲ/PMPDSAH IPN组移植材料与兔角膜融合较好,术后2周材料部分降解,术后1个月材料均完全降解,术后6个月新生胶原纤维排列整齐,角膜上皮细胞中K3表达阳性.结论 RHC-Ⅲ/PMPDSAH IPN与兔眼的生物相容性较好,NGF可以有效地促进角膜创口愈合和上皮再生,提高其力学强度后,有望作为一种安全有效的角膜替代物.
