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兔原代肝细胞文献资料
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3D生物打印技术在构建兔原代肝细胞水凝胶结构体片段上的研究
目的 通过三维(3D)生物打印兔原代肝细胞-海藻酸钠-明胶共混物,探讨3D生物打印技术构建类肝水凝胶结构体片段的可行性.方法 采用Ⅳ型胶原酶消化法提取分离新生兔原代肝细胞;制备海藻酸钠-明胶水溶胶,与兔原代肝细胞共混;采用圆柱状微丝逐层交错堆积技术,进行兔肝细胞-海藻酸钠-明胶共混物的3D生物打印,获得三维结构体.用钙黄绿素-AM和碘化丙啶溶液对该结构体进行活/死细胞双荧光染色,评价打印后及培养后兔肝细胞的活性,计算细胞存活率.结果 通过按照设计的参数,打印出含有兔原代肝细胞的网格状水凝胶结构体.该结构体的规格为10mm×10mm×1.2 mm,微丝间的孔隙相互通连,孔隙大小约450 μm×450 μm.打印后的兔肝细胞在三维结构体中仍可增殖,活/死细胞荧光染色结果表明结构体中兔肝细胞的存活率为82％±3％,兔原代肝细胞在结构体中分布均匀.结论 本研究实现了兔肝细胞共混物结构体的3D生物打印,为构建类肝组织工程结构体片段提供新思路.
