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  • 星状病毒70 mer探针寡核苷酸芯片制备及杂交条件的优化

    作者:岳龙涛;高雪芹;潘继红;樊景凤;韩金祥;黄海南

    目的 探讨有利于制备多种病毒长探针平行检测芯片的佳制备及杂交条件.方法 通过引物直接标记方法,对70 mer探针寡核苷酸芯片的点样浓度、点样后固定方案、杂交温度、杂交时间进行优化.结果 70 mer寡核苷酸探针点样浓度在10 μmol/L时就可获得较高的的荧光强度,探针点样干燥后在3 600 mJ条件下紫外交联固定效果好,在65 ℃条件下杂交8 h能获得优杂交结果,所用杂交液是5×SSC(0.5%SDS、50 %甲酰胺、1%鲑鱼精DNA).结论 本实验优化了70 mer探针寡核苷酸芯片制备及杂交条件;此为进一步研制多种海洋环境人致病性病毒检测芯片奠定了基础.

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