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双层软琼脂实验文献资料
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永生化骨髓间充质干细胞克隆形成能力和致瘤性的实验研究
目的 探讨永生化人骨髓间充质干细胞(hBMSC)用于软骨组织工程的可能性及安全性.方法 自健康志愿者骨髓中提取原代hBMSC,流式细胞仪检测表型后建立永生化hBMSC,将hBMSC及永生化hBMSC细胞悬液接种于双层软琼脂培养基中,2周后观察克隆形态并计算克隆形成率;将两种细胞接种于裸鼠背部皮下,术后3 d及1、3个月肉眼观察成瘤情况.结果 hMSC表面抗原CD34、CD45表达阴性,CD29、CD71、CD106表达阳性;hBMSC未能在软琼脂中形成克隆,永生化hBMSC克隆形成率为0.3%;永生化hBMSC接种裸鼠后3 d接种部位有细胞聚集的团块,1、3个月时均未见肿瘤形成.结论 本研究通过转基因技术建立的永生化hBMSC增殖能力较强,但无致瘤性,可作为种子细胞用于软骨组织工程中.
