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Kisspeptin对早期胎盘滋养层细胞的调节作用
目的 探讨黑色素转移抑制基因(Kisspeptin,KP)基因在早期胚胎中对滋养层细胞的调节作用.方法 免疫细胞化学法检测滋养层细胞KP和KP受体GPR54表达,实时定量RT-PCR检测Kisspeptin基因表达,SDS-PAGE和western-blot检测Kisspeptin蛋白表达,细胞划痕实验检测滋养层细胞侵袭性.结果 90％以上培养的细胞均表达KP和其受体GPR54;KP抑制滋养层细胞迁移率为44.1％,KP抑制MMP-9和VEGF表达.结论 KP抑制早期胎盘滋养层细胞迁移,抑制ERK和血管活化相关因子.
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KP对早期胎盘滋养层细胞迁移及细胞内ERK、MMP-9、VEGF表达的影响
目的 探讨黑色素转移抑制基因(KP)对早期胎盘滋养层细胞迁移及细胞内细胞外调节蛋白激酶(ERK)、MMP-9、VEGF表达的影响.方法 取自愿终止妊娠者胎盘,剪取胎盘绒毛膜组织,分离并培养滋养层细胞.将滋养层细胞随机分为三组,对照组常规培养,KP组加入终浓度为100 nmol/L KP蛋白进行培养,KP+ P234组加入终浓度为100 nmol/L KP蛋白及其抑制剂P234(终浓度5μmol/L)进行培养,均培养30 min.用细胞划痕实验检测各组滋养层细胞迁移率;荧光定量PCR法检测细胞内KP、GPR54、MMP-9、VEGF mRNA表达;Western blot-ting法检测细胞内ERK蛋白表达.结果 与对照组比较,KP组、KP+ P234组细胞迁移率低(P均＜0.05),KP组低(P＜0.05).KP组KP mRNA相对表达量较KP+ 234组高(P＜0.05),与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05);三组GPR54 mRNA相对表达量比较,P均＞0.05;与对照组比较,KP组、KP±P234组MMP-9、VEGF mRNA相对表达量低(P均＜0.05),KP组低(P均＜0.05).与对照组比较,KP组、KP±P234组ERK蛋白相对表达量低(P均＜0.05),KP组低(P＜0.05).结论 KP可抑制早期胎盘滋养层细胞迁移,抑制细胞内ERK、MMP-9及VEGF表达.
