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蛋氨酸亚砜还原酶B1在糖尿病小鼠肾脏中的表达变化及其与氧化应激的关系
目的：探讨链脲佐菌素（STZ）诱导的糖尿病小鼠肾组织中蛋氨酸亚砜还原酶B 1（MsrB 1）的表达变化及其与氧化应激的关系。方法将10周龄雄性C57BL/6小鼠随机分为4组：正常对照组（NC 组）、单侧肾切除组（UX组）、STZ组和单侧肾切除加STZ组（STZ-UX组）。模型制备后第8周末，免疫组化法检测MsrB 1在肾组织中的表达和分布；实时定量PCR、Western blotting检测MsrB1 mRNA及蛋白水平的变化；通过丙二醛（M DA）、蛋白羰基（PC）和总巯基（TS H）测试盒检测氧化损伤情况。结果 MsrB1表达于小鼠肾小管上皮细胞的细胞核和细胞质。与NC 组相比，STZ组和STZ-UX组MsrB1表达量和TS H含量减少（P＜0．05），而M DA、PC 含量增加（P＜0．05），且STZ-UX组比STZ组变化更明显；UX组没有明显改变（P＞0．05）。相关性分析结果显示，STZ组和STZ-UX组MsrB1蛋白表达与M DA和PC呈负相关（P＜0．05），与TS H含量呈正相关（P＜0．05）。结论在STZ诱导的糖尿病小鼠肾组织中，MsrB 1表达明显减少，这种变化可能参与了糖尿病肾病（DN）氧化应激的发生。
关键词： 蛋氨酸亚砜还原酶B1 氧化应激 糖尿病肾病 C57BL/6小鼠 -
MsrB1对ONOO-诱导的人晶状体上皮细胞周期的影响
目的 探讨蛋氨酸亚砜还原酶B1 (methionine sulfoxide reductase B1,MsrB1)基因沉默对过氧亚硝酸根(ONOO)诱导的人晶状体上皮细胞(human lens epithelial cells,HLEC)细胞周期的影响和ERK信号通路在其中的调节作用.方法 将培养的HLEC分为两组:正常组和MsrB1基因沉默组,分别用0μmol·L-1、100 μmol·L-1、200μmol·L-1和300μmol·L-1ONOO-处理20 min后,继续培养12 h用RT-PCR法检测MsrB1基因表达水平变化,流式细胞仪检测细胞周期水平变化,Western blot法检测MsrB1基因沉默和ONOO对pERK表达水平的影响.结果 300 μmol·L-1ONOO-处理HLEC会导致MsrB1表达水平显著下降(P＜0.01),当MsrB1基因沉默细胞经300 μmol·L-1ONOO-处理后,MsrB1表达水平进一步显著下调(P＜0.05).经200μmol·L-1或300 μmol·L-1ONOO-处理,HLEC细胞周期分别阻滞在G2/M期和S期,当MsrB1基因沉默细胞经200μmol·L-1或300μmol·L-1ONOO-处理后,更多的细胞阻滞在G2/M期或S期(P＜0.05) pERK检测结果表明,MsrB1基因沉默前后经ONOO处理导致的细胞周期阻滞和pERK表达水平显著下降有关(P＜0.01).结论 ONOO可以下调HLECMsrB1表达水平,MsrB1基因沉默细胞经ONOO处理,pERK表达水平显著下降,导致更多细胞阻滞在G2/M期和S期.
