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siRNA干扰YKL-40对乳腺癌增殖能力影响的实验研究
目的:探究YKL-40与乳腺癌的增殖能力的关系及其机制.方法:采用免疫荧光检测乳腺癌MCF-7细胞YKL-40的基础表达情况.荧光显微镜观察转染率,Real-time PCR筛选沉默效果强的YKL-40 siRNA.Western blot检测PI3K/AKT通路相关蛋白PI3K、P-PI3K、AKT和P-AKT的表达水平,同时MFT和流式细胞仪分别验证YKL-40 siRNA处理的人乳腺癌MCF-7细胞,24、48和72 h各组细胞增殖能力和细胞周期的差异.结果:MCF-7细胞可表达YKL-40蛋白,主要定位于细胞质.Real-time PCR显示siRNA01、siRNA02、siRNA03组较NC组YKL-40基因沉默效果显著,其中以siRNA02沉默效果强(P<0.01).Western blot可见实验组较对照组总的PI3K和AKT保持不变,而P-PI3K、P-AKT表达量下降(P<0.05).实验组较对照组G1期细胞增多(P<0.01),而S期细胞减少(P<0 01).MTT显示实验组较对照组增值能力下降(P<0.01).结论:乳腺癌中YKL-40可作为PI3K/AKT信号通路上游调控因子并影响细胞周期的进程,进而调节乳腺癌的增殖能力,提示YKL-40对于乳腺癌的治疗可能是一个重要靶点.
关键词: 人类软骨糖蛋白HC gp-39 乳腺肿瘤 PI3K/AKT 细胞周期 基因调控