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miR-148a/b文献资料
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miR-148a／b真核表达质粒的构建及其在胰腺癌细胞系中的表达
目的：构建miR-148a/b真核表达质粒，转染胰腺癌AsPC-1细胞，并观察其miR-148a/b的表达水平。方法根据miRBase提供的序列合成miR-148a/b前体，PCR扩增后形成双链，插入线性化真核表达质粒pcDNA3．1，构建pcDNA3．1/miR-148a/b，进行酶切和测序鉴定。将胰腺癌 AsPC-1细胞分4组进行质粒转染：转染 pcDNA3．1/miR-148a（miR-148a组）、转染 pcDNA3．1/miR-148b（miR-148b组）、转染 pcDNA3．1（空质粒对照组）和仅加脂质体（空白对照组）。转染48 h后，采用定量 PCR法检测各组细胞中 miR-148a/b 的表达量。结果 pcDNA3．1/miR-148a/b的酶切和测序与miRBase提供的序列完全一致。转染48 h后，miR-148a组 AsPC-1细胞中的 miR-148a表达量明显高于空质粒对照组和空白对照组（6．76±0．35比1．00±0．54、1．02±0．40，均P＜0．05），miR-148b 组AsPC-1细胞中的miR-148b表达量明显高于空质粒对照组和空白对照组（3．28±0．08比1．02±0．35、1．01±0．28，均P＜0．05）。结论成功构建了 miR-148a/b真核表达质粒 pcDNA3．1/miR-148a/b，该质粒能显著上调胰腺癌 AsPC-1细胞的miR-148a/b表达水平。
关键词： miR-148a/b 真核表达质粒 胰腺癌
