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反枝苋花粉文献资料
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反枝苋花粉泛过敏原 profilin 基因的克隆表达、纯化及免疫学鉴定
目的：克隆表达反枝苋花粉中泛变应原肌动蛋白抑制蛋白（profilin），并鉴定其免疫学活性。方法利用RT-PCR 结合 RACE 技术克隆反枝苋花粉泛变应原 profilin 的全长基因，并进行序列分析。设计带有酶切位点的特异性引物，采用 RT-PCR 获得整个反枝苋花粉 profilin 的开放阅读框，将其与 pET28a 载体连接并转化大肠杆菌BL21（DE3）进行诱导表达，Ni2＋亲和层析柱纯化重组蛋白，采用 Western-blot 检测其 IgE 结合活性。结果cDNA核苷酸测序表明反枝苋花粉 profilin 的全长基因由675个碱基组成，开放阅读框为399 bp，编码131个氨基酸。重组反枝苋花粉 profilin 在大肠杆菌中可溶性表达，进一步经 Western-blot 检测具有良好的 IgE 结合活性。结论成功地克隆和表达了反枝苋花粉 profilin，并具有良好的 IgE 应答免疫活性。
