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四引物法快速检测白细胞介素1A基因3'UTR插入/缺失多态性
目的 建立四引物扩增受阻突变体系聚合酶链反应(tetra-primer amplification refractory mutation system poly-merase chain reaction,T-ARMS-PCR)检测白细胞介素1A基因3'UTR插入/缺失多态性的方法.方法 使用试剂盒提取100例志愿者血样的基因组DNA,设计四引物检测白细胞介素1A基因3'UTR插入/缺失多态性的引物,对PCR的反应体系和扩增条件优化后对100例样本分型.DNA测序验证四引物法的准确性.结果 100例样本中Del/Del基因型39例,Ins/Ins基因型10例,Ins/Del基因型51例.DNA测序与四引物法的分型结果完全一致.结论 四引物法可以实现白细胞介素1A基因3'UTR插入/缺失多态性的快速、简便、低成本检测.
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Tetra-primer ARMS PCR检测丙型肝炎患者IL-28B rs12979860基因多态性
目的 评价四引物扩增受阻突变体系聚合酶链反应(Tetra-primer ARMS PCR)检测IL-28B rs12979860基因多态性在丙型肝炎患者抗病毒治疗中的应用.方法 选取2015年5月至2016年7月就诊的慢性丙型肝炎患者275例,提取外周血DNA,建立Tetra-primer ARMS PCR检测体系,与Sanger测序法对比验证,检测该地区丙型肝炎患者IL-28B rs12979860基因多态性分布情况.结果 Tetra-primer ARMS PCR检测体系成功建立,与Sanger测序法的符合率100％,rs12979860基因的C/C型、C/T型和T/T型的分布频率分别为86.5％、12.0％、1.5％.在C/C型组与C/T或T/T型组中,年龄分布、性别分布、HCV基因1b型比例差异均无统计学意义(P＞0.05);患者肝硬化比例和持续病毒学应答比例比较差异有统计学意义(P＜0.05),在C/T或T/T组中肝硬化比例较高,在C/C组中持续病毒学应答比例较高.结论 该研究建立的Tetra-primer ARMS PCR技术是一种操作简单、成本低廉、快速有效的基因多态性检测方法,对于丙型肝炎患者IL-28B rs12979860基因多态性基因分型具有很好的临床应用价值.
