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  • 恶性疟原虫海南株AMA-1、Pfs230基因的序列分析

    作者:单志新;余新炳;李学荣;马长玲;徐劲;罗树红;吴忠道

    目的测定恶性疟原虫海南(FCC1/HN)株裂殖子顶端膜抗原1(AMA-1)基因和Pfs230基因序列,并分别进行序列分析.方法根据AMA-1基因已知序列合成一对引物,用PCR技术从恶性疟原虫FCC1/HN株基因组DNA中扩增AMA-1基因,构建真核表达重组质粒pcDNA3-AMA-1.根据Pfs230基因已知序列合成七对引物,分7段从FCC1/HN株基因组DNA中扩增Pfs230基因,并分别将扩增片段插入pMD-18T测序载体.用双脱氧链末端终止法测定克隆的AMA-1、Pfs230基因序列,应用DNAstar软件辅助进行序列分析和同源性比较.结果 PCR扩增得到恶性疟原虫FCC1/HN株AMA-1和Pfs230基因片段.恶性疟原虫FCC1/HN株AMA-1基因全长1 869bp,无内含子,编码622个氨基酸残基,不存在氨基酸重复序列,相对分子量约 72.045kDa;Pfs230基因全长9435bp,无内含子,编码3 144个氨基酸残基,分子量为364.36kDa.恶性疟原虫FCC1/HN株与FC27、7G8、CAMP、FCR3、Thai-Tn、3D7、FVO、KF1916、CMP1、HB3、K1和V1株AMA-1的同源性在94.9%以上,各株间有53个位置相同的氨基酸残基替代位点,并且发生替代的氨基酸残基具二态性.FCC1/HN株分别比3D7、7G8株Pfs230抗原多9、10个氨基酸残基,三个分离株有28个氨基酸替换位点.结论序列测定及同源性分析表明,恶性疟原虫FCC1/HN株与其它分离株的AMA-1、Pfs230具有很高的同源性.

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