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  • RTCA 实时定量动态监测 HCMV 在MRC-5细胞上的增殖的研究

    作者:张业婷;钟峰;姚瑶;赵俊;俞海洋;张文昌;陈敬贤;王明丽

    目的:采用实时细胞分析(RTCA)系统监测人巨细胞病毒(HCMV)在 MRC-5细胞株上的复制增殖过程,评价此方法在动态监测病毒增殖中的应用价值。方法应用RTCA 动态观察 MRC-5细胞在不同阶段的生长指数(CI),选择合适的细胞浓度进行 HCMV 增殖的研究,同时采用传统的空斑形成试验和间接免疫荧光实验作为该方法学的比较和结果验证。结果选择 MRC-5适细胞浓度为0.5×105个/孔;与空斑试验及免疫荧光结果比较,半数细胞指数CI 值对应时间(CIT50)与病毒初始滴度有良好的线性关系;同时 CI 值与病毒滴度随着时间的持续,显示出明显的负相关性(r =-0.977,P <0.05)。结论RTCA 技术可实时监测记录细胞生长状态,反应细胞贴壁、伸展,同时能实时定量监测 HCMV 增殖复制状况,数据客观可靠,为今后基础实验研究提供了新的实验技术和方法。

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