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RhD初筛阴性患者RhD变异体检测分析
目的 对本地区RhD初筛阴性患者进行RhD变异体检测分析.方法 随机收集直接抗人球蛋白试验的RhD初筛阴性标本63例,按其血浆中是否含有抗D分成抗体阳性组和抗体阴性组,然后采用三批抗D-微柱凝胶抗人球蛋白法进行弱D确认试验和Del鉴定试验.结果 抗体阴性组的弱D确认试验阳性率为3.3％(2/60),其中弱D型占1.7％(1/60),部分D型占1.7％(1/60);抗体阳性组的弱D确认试验阳性率为0(0/3),未发现弱D型与部分D型.抗体阴性组Del鉴定总阳性率为95.0％ (57/60),其中三批抗D试剂的阳性率分别为88.3％(53/60)、91.7％(55/60)和68.3％(41/60),批间差异有统计学意义(P＜0.01);抗体阳性组Del鉴定总阳性率为100％(3/3),其中三批抗D试剂的阳性率分别为66.7％(2/3)、100.0％(3/3)、33.3％(1/3).结论 本地区部分RhD初筛阴性患者实际为弱D型或部分D型,临床有必要对RhD初筛阴性患者进行弱D确认;绝大多数RhD初筛阴性患者实际属于Del型,但不同来源的单克隆试剂对Del的检出情况差异较大;三批抗D试验均阳性的Del患者仍有可能产生免疫性抗D可能,临床患者似无进行Del型鉴定的必要.
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Rh复合体的结构与功能
Rh血型系统发现距今已有60多年,在临床输血医学中是一个复杂且具有多型性的血型系统,由两个同源性很高的RHD和RHCE基因编码的具有12次跨膜的RhD和RhCE蛋白,RHAG基因编码Rh有关糖蛋白RhAG,这些蛋白和其他膜蛋白(LW,IAP,GPB,Duffy,带3)在红细胞膜上形成一个核心复合物,参与氨的转运.在临床输血中,Rh血型系统可引起胎儿和新生溶血病(HDN)和输血反应.RH基因遗传背景存在种族差异,同时也存在多种类型的RhD变异体,现将Rh血型系统的分子遗传情况及其在临床的应用综合如下.
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番禺地区RHD变异体基因分型研究
目的 研究分析番禺地区RHD变异体基因分型特征.方法 采用微量板法对2010年11月～2011年8月到本站参加献血的26 172名次献血者进行RhD阴性筛查;采用抗球蛋白法对初筛RhD阴性的标本进行确认,采用吸收放散试验对经抗球蛋白法确认为RhD阴性的标本进行Del表型筛选;采用RH基因变异体基因分型检测试剂盒(PCR-SSP法)对献血者模板DNA进行扩增,对扩增产物进行电泳分析,根据电泳图谱判断RHD基因分型.对血清学与基因分型结果不符的标本进行测序分析.结果 初筛检出60名RhD阴性,经抗球蛋白法确认59例为RhD阴性,阴性频率为0.23％;吸收放散试验检出10例Del表型.60例初筛阴性的基因分型检测发现40例RHDEXONl～ 10全缺失基因型,发生频率约为67.8％;10例RHD 1227A DEL基因型,发生频率约为16.9％;7例部分D,发生频率约为11.9％;1例RHD弱D15基因型,发生频率约为1.2％;2例RHD基因分型阳性需作进一步碱基测序分析.结论 本地区血清学RhD阴性献血者中,存在RHD 1227A DEL、RHD-CE(2-9)-D,RHD-CE(5)-D、RHD-CE(6-9)-D和RHD弱D15等基因型,血清学结合基因分型能更准确鉴定RhD血型.
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贵阳市无偿献血人群RhD变异体的基因型分析
目的 研究分析PhD抗原变异体的血清学表型和基因型.方法 收集贵阳市159名无偿献血者RhD盐水法初筛阴性的标本,采用间接抗球蛋白试验(IAT)筛出部分D型和弱D型抗原,用乙醚吸收放散试验检出De(l)型抗原,并对Rh表型(C、c、E、e抗原)进行血清学检测.同时运用序列特异性引物-聚合酶链反应(PCR-SSP)对RhD变异型D抗原外显子进行扩增和选择性测序以判定其确切型别.结果 159例RhD初筛阴性标本中检出RhD变异型53例(33.3％),包括Del 1227G＞A、3G＞A 46例(28.9％)、部分D DVI typeⅢ RHD-CE(3-6)-D 3例、弱D15 845 G＞A3例、弱D24 1013T＞C 1例.Rh表型结果显示,ccee 65例、Ccee 79例、CCee 11例、ccEe和CcEe各2例.结论 贵阳市无偿献血人群中RhD变异体的基因型呈现多态性,其中主要为Del型.
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儿童患者RhD弱阳性变异体的初步分析
目的 对RhD弱阳性儿童患者进行RhD变异体检测分析.方法 用微柱凝胶血型鉴定卡及盐水试管法进行RhD血型初筛;微柱凝胶抗球法进行弱D确认试验;确认试验RhD弱阳性者进行PCR-SSP及RHD外显子测序分析.结果 RhD初筛阴性46例(0.38％),确认实验检出弱阳性4例(8.7％);4例RhD弱阳性标本经基因检测,1例1227A杂合子(Del型),1例DⅢa型,2例弱D15型.结论 Del型也可能被血清学方法检出;RhD弱阳性患者中抗原数量减少者较多;针对RhD阳性红细胞是否产生需进一步研究.
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南昌地区RhD阴性人群Rh表型及RhD基因型多态性研究
目的：对南昌地区汉族RhD阴性血型人群进行统计，了解RhD阴性标本中RhD抗原变异体的血清学表型及基因型分布情况，并探讨其在临床输血上的意义。方法收集218例经RhD盐水法初筛为RhD阴性的标本，采用间接抗球蛋白试验（IAT）筛出部分D型和弱D型抗原，用吸收放散试验（absorption test）检测Del型抗原；并对Rh表型(C、c、E、e抗原)进行常规血清学检测。结果218例RhD阴性标本中，检出变异体等位基因63个，其中部分D表型和弱D表型占15.87%（10/63），DEL表型占84.13%（53/63）；RhD(-)人群中基因频率分别为dccee (46.33%)、dCcee(33.03%)、dCCee(4.59%)、dccEe(5.50%)、dCcEe(9.63%)、dccEE(0.46%)和dCCEe(0.46%)。结论南昌地区RhD阴性汉族人群RhD基因结构呈现多态性，对于Rh阴性的供血者进一步检验排除RhD抗原变异体，对于临床上安全输血具有十分重要的临床意义。
