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反义CD147分子对人胆管癌细胞株侵袭性影响的实验研究
目的 探讨反义CD147分子对人胆管癌细胞株QBC939侵袭性的影响.方法 构建含反义CD147分子片段的重组真核表达质粒,将人胆管癌细胞株QBC939分为三组:(1)反义CD147组,运用重组真核表达质粒asCD147-pcDNA3.1(-)转染QBC939细胞;(2)空质粒组,运用pcDNA3.1(-)空质粒转染QBC939细胞;(3)对照组,运用DMEM常规处理细胞.采用MTT法检测各组QBC939细胞的生长情况,RT-PCR和Western blotting法分别对三组QBC939细胞中的CD147、MMP-2、MMP-9、TIMP-2的mRNA表达水平及其对应蛋白的表达水平进行检测.结果 成功构建了携带反义CD147分子片段的重组真核表达质粒.MTT法检测显示:三组QBC939细胞的生长曲线及对数生长期情况无统计学差异(P>0.05).RT-PCR法检测显示:反义CD147组QBC939细胞中CD147和MMP-2分子的mRNA表达均低于空质粒组和对照组(P<0.05),且空质粒组与对照组相比无统计学差异(P>0.05);反义CD147组QBC939细胞中MMP-9和TIMP-2分子的mRNA表达与空质粒组和对照组相比无统计学差异(P>0.05).Western blotting检测发现:与空质粒组和对照组相比,反义CD147组QBC939细胞中CD147和MMP-2分子的蛋白表达明显降低(P<0.05),空质粒组与对照组相比无统计学差异(P>0.05);与空质粒组和对照组相比,反义CD147组QBC939细胞株中MMP-9和TIMP-2分子的蛋白表达无统计学差异(P>0.05).结论 (1)反义CD147对胆管癌细胞株QBC939的生长无影响;(2)反义CD147对胆管癌细胞株QBC939中MMP-9和TIMP-2的mRNA表达及对应蛋白表达无影响;(3)反义CD147降低胆管癌细胞株QBC939中CD147和MMP-2的mRNA表达及对应蛋白表达,可能会降低胆管癌细胞株的侵袭性.
