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  • miR-19b 沉默对 P19细胞分化及线粒体功能的影响

    作者:刘雪华;朱莎莎;余章斌;朱春;李萌萌;韩树萍;胡晓山;朱金改;彭宇竹

    目的:通过沉默微小RNA-19b( miR-19b)研究miR-19b对P19细胞分化及线粒体功能的影响。方法:转染miR-19 b沉默质粒与空载质粒进入P19细胞建立起稳定的细胞系;线粒体功能分析用以检测细胞凋亡;诱导分化 P19细胞,实时定量荧光 PCR 检测 miR-19 b 沉默后细胞分化关键基因表达水平。结果:TargetScan 5.1软件及双荧光素酶报告基因系统共同证实,Wnt1为miR-19b在P19细胞中发挥作用的靶点( P<0.05);测定第0、4、6、8、10、12天cTnT、NKX2.5、GATA4等基因的核酸表达量显示,心肌分化相关标志基因逐渐增高,miR-19 b沉默组明显低于对照组( P<0.05);于分化第10天检测线粒体功能,发现miR-19 b沉默组线粒体DNA拷贝数的相对含量高于对照组,其活性氧水平显著低于对照组,ATP水平也高于对照组(均P<0.05)。结论:miR-19b沉默可抑制细胞凋亡,抑制心肌细胞分化。

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