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鲨肝再生因子文献资料
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一种鲨肝再生因子类似物的克隆表达及纯化
获得可溶性表达的鲨肝再生因子类似物,初步研究性质与活性.构建含有鲨肝再生因子类似物片段的原核表达载体pET 32a-S;转化BL21,IPTG诱导表达融合蛋白,表达产物经过分离纯化-FXa酶切-分离纯化,得到鲨肝再生因子类似物;利用MTT比色法研究该重组产物对肝癌细胞株SMMC-7721的增殖活性.结果原核表达的融合蛋白在大肠杆菌中以可溶的形式存在,表达量为40%,分子质量为30 ku,去除融合子后的鲨肝再生因子类似物分子质量为12kμ,PI=4.7.活性研究显示在6.25~50μg/ml浓度范围内,类似物与天然产物均有相似的刺激SMMC-7721细胞株增殖的活性,但是在高浓度下却表现出了抑制活性.