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DnaK基因文献资料
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可承载CETP多肽表位的颗粒样蛋白表达载体的克隆、表达与分离纯化
为了提高多肽表位的免疫原性,利用乙肝病毒核心抗原能够在体外自行组装成病毒样颗粒的特性,将人源胆固醇酯转运蛋白羧基端26个氨基酸连同大肠杆菌DnaK基因C端结构域克隆入乙肝病毒核心抗原的免疫优势决定区,并在大肠杆菌BL-21(DE3)表达,以包含体形式存在,经过洗涤、复性和分子筛纯化,获得纯度达90%以上的目的蛋白.纯化的蛋白免疫新西兰大白兔后能够诱导产生高水平的抗胆固醇酯转运蛋白的抗体,表明乙肝病毒核心抗原能够在体外自发装配成多聚体颗粒,并能够将插入其免疫优势决定区的胆固醇酯转运蛋白(CETP)多肽表位展示于颗粒表面以提高免疫原性,显示出其作为疫苗免疫载体的良好前景.
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沙门菌NASBA快速检测试剂的研制
目的:建立一种快速、简便的恒温核酸扩增(NASBA)方法.方法:用AMV RTase、RNase H、,T7RNA聚合酶以及相应的缓冲成分组成的恒温扩增系统,对dnak基因RNA序列进行扩增.结果:经50 min反应后均可扩增出预期120pb大小的产物,第1次PCR产物经转录实验后与NASBA直接扩增的产物具有较好的同源性,其灵敏度达到103CFU.结论:NASBA法对沙门菌检测具有良好的特异性和灵敏度.
