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SPT15文献资料
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全局转录工程法构建产S-腺苷蛋氨酸重组酿酒酵母的研究
利用全局转录工程(global transcription machinery engineering,gTME)方法对酿酒酵母RNA聚合酶Ⅱ中的转录因子SPT15和TAF25编码的基因进行克隆并结合易错PCR随机突变,将SPT15和TAF25的易错PCR产物连接改造的pYES2.0表达载体.并用醋酸锂转化的方法转化酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae CGMCC 2846中,研究了SPT15和TAF25的定向进化对酿酒酵母产S-腺苷甲硫氨酸(S-adenosylmethionine,SAM)的影响.经过筛选分别获得了重组酿酒酵母菌株spt15-81和taf25-36.对其发酵性状分别进行了初步研究,在28℃、200 r/min条件下,250 mL摇瓶(50 mL O-medium)发酵48 h时,SAM的产量分别比对照菌株提高了2.0倍和1.8倍.由此表明,SPT15和TAF25是对酿酒酵母进行代谢工程改造的重要转录因子
