您当前的位置：
首页 > 文献资料
所属专业：
底物宽泛性文献资料
-
bgtfA在东方拟无枝酸菌中异源表达及其产物鉴定
在万古霉素产生菌东方拟无枝酸菌(Amycolatopsis orientalis)中异源表达Balhimycin产生菌来源的糖基转移酶基因bgtfA,从而在工程菌发酵液中获得杂合万古霉素,以探索糖基转移酶BgtfA能否作为一个独立的元件在异源宿主中发挥催化作用.首先将bgtfA基因克隆至载体质粒pULVK2AE,构建重组质粒pLYEBA2AE,然后采用电转化方法将质粒导入东方拟无枝酸菌,用HPLC和LC-MS检测、验证工程菌发酵液中是否存在BgtfA的催化产物.成功地在东方拟无枝酸菌(Amycolatopsis orientalis)异源表达bgtfA基因,经HPLC和LC-MS检测分析,在工程菌的发酵液中获得预期的BgtfA催化产物,杂合万古霉素LYV07ww01.这表明BgtfA有一定的底物宽泛性,不仅能够催化表万古糖胺与balhimycin苷元的连接,还能催化万古糖胺连接至万古苷元.
-
海洋芽孢杆菌大环内酯糖基转移酶BmmGT1糖基受体广谱性探究
目的 对海洋芽孢杆菌B-9987中糖基转移酶BmmGT1糖基受体的广谱性进行探究.方法 以UDP-D-葡萄糖为糖基供体,与不同糖基受体进行体外酶促反应,通过高效液相色谱(HPLC)检测反应产物,并采用高分辨质谱(HRMS)手段对糖基化产物进行初步鉴定.结果 糖基转移酶BmmGT1能够以UDP-D-葡萄糖为糖基供体,识别两性霉素B以及氯霉素,分别生成两性霉素B双糖基化和单糖基化衍生物以及氯霉素单糖基化衍生物,得到3个糖基化产物.结论 糖基转移酶BmmGT1对糖基受体的选择有灵活性,可作为潜在的工具酶用于化合物结构多样性研究.
