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基于iTRAQ技术的伴放线聚集杆菌细胞致死性扩张毒素诱导Jurkat细胞的凋亡研究
目的：探索伴放线聚集杆菌（Aggregatibacter actinomycetemcomitans， A．a）的一种毒力因子（cytolethal distending toxin， CDT）诱导人T淋巴细胞发生凋亡过程中表达改变的信号分子。方法培养Jurkat细胞，并进行分组：不做处理的正常细胞对照组、野生型A．a CDT刺激Jurkat细胞的野生组、突变型A．a CDT刺激Jurkat细胞的突变组，应用iTRAQ技术检测A．a CDT作用Jurkat细胞24 h过程中表达差异蛋白。结果通过筛选，我们得到20个凋亡相关的蛋白（变化倍数＞1．3），其中表达上调的有8个（ CASP8／CD3E／YY1／SH3BGRL3／P53／CASP3／ UBE2I／ TNFRSF10B ），表达下调的有12个（ F5／RPL18A／DAD1／MTCH2／HIST1H1E／CNBP／RBM25／SLC16A1／KDM2A／CD99／RAC2／TMX1）。结论本研究检测出了伴放线聚集杆菌细胞致死性膨胀毒素诱导人 T 淋巴细胞凋亡过程中表达差异的蛋白，并筛选了一条可能的信号通路 UBE2I／P53／TNFRSF10B／CASP8／CASP3，为下一步研究及临床治疗局限型侵袭性牙周炎提供思路。
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伴放线聚集杆菌细胞致死性膨胀毒素介导人T淋巴细胞凋亡的实验研究
目的 通过研究伴放线聚集杆菌(aggregatibacter actinomycetemcomitans,A.actinomycetemcomitans)的一种毒力因子细胞致死性膨胀毒素(cytolethal distending toxin,CDT)诱导人T淋巴细胞发生凋亡过程中表达改变的相关基因,探索其凋亡过程中可能存在的相关信号调节通路,寻找侵袭性牙周炎诊断、治疗潜在的生物标记分子.方法 通过透射电镜和流式细胞仪检测细胞凋亡的情况,荧光定量PCR检测CDT蛋白作用于人T淋巴细胞后凋亡相关基因表达的改变.结果 CDT蛋白作用于人T淋巴细胞24 h后,处理组细胞凋亡比例约为29.1％,对照组约为6.3％,透射电镜观察到典型的凋亡细胞的形态,如细胞体积缩小、染色质浓缩及边集等现象.荧光定量PCR结果显示促凋亡基因GADD45A、TNFSF8、TRADD、TNFRSF10B和TP53表达升高.结论 伴放线聚集杆菌CDT可以促进人T淋巴细胞的凋亡,在这一过程中相关的促凋亡基因表达增加.
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伴放线放线杆菌细胞致死性膨胀毒素研究进展
伴放线放线杆菌产生一种毒性蛋白成分--细胞致死性膨胀毒素(cytolethal distending toxin,CDT).该毒素由3个相邻基因cdtA(669 bp)、cdtB(852 bp)、cdtC(561 bp)编码的蛋白亚基CdtA(28 000 Da)、CdtB(32 000 Da)、CdtC(20 000 Da)组成异源三聚体全毒素.CDT引起细胞膨胀,导致细胞周期阻滞,抑制细胞增殖,还能诱导淋巴细胞凋亡,影响宿主免疫功能,诱导细胞因子分泌等,在牙周病的发生发展过程中发挥至关重要的作用.本文就伴放线放线杆菌CDT各亚基及其致病机制作一综述.
