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Snail 介导 GOLPH3对人脑胶质瘤细胞迁移和侵袭作用的研究
目的：研究GOLPH3影响脑胶质瘤细胞的迁移和侵袭能力及机制。方法观察GFP荧光和Western blot鉴定过表达或下调GOLPH3的U251细胞；分别应用RT-PCR、Western blot 实验检测GOLPH3对Y-box binding protein 1（YB1）蛋白及核酸水平、对MMP-2及Snail的调节；采用Snail siRNA下调Snail的表达后，Western blot检测Snail及YB1的水平，细胞划痕实验和Transwell侵袭实验检测Snail对细胞的侵袭迁移能力的影响；Western blot检测在过表达GOLPH3的U251细胞中下调Snail后，GOLPH3、Snail及YB1的水平；同时应用细胞划痕实验和Transwell 侵袭实验检测此共转实验对细胞迁移和侵袭能力的影响。结果下调GOLPH3抑制YB1的蛋白与核酸水平以及MMP2核酸水平。下调GOLPH3抑制Snail 的蛋白表达，过表达GOLPH3，Snail表达量增加。下调Snail后，YB1的表达量降低，并抑U251细胞的侵袭与迁移能力。过表达GOLPH3引起的细胞的迁移和侵袭能力增加被下调Snail所逆转。结论 GOLPH3通过Snail调节YB1的表达，调节U251细胞的迁移和侵袭能力。
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下调GOLPH3通过P-YB1途径抑制胶质瘤细胞侵袭和迁移的研究
目的 探讨癌基因GOLPH3影响胶质瘤细胞侵袭和迁移的机制.方法 将真核表达质粒GOLPH3shRNA with GFP tagged和对照质粒GOLPH3 shNC转入人胶质瘤U25l细胞中,Western blot技术检测GOLPH3、GOLPH3 L、YB1、P-YB1蛋白表达,细胞划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力.结果 与对照组比较,转染GOLPH3 shRNA with GFP tagged质粒24h后U25l细胞侵袭能力下降49％、迁移能力下降58％,差异均有统计学意义(P＜0.01);转染GOLPH3 shRNA可以明显降低YB1、P-YB1蛋白的表达(P＜0.01).结论 下调GOLPH3可以通过降低YB1、P-YB1的表达,进而抑制胶质瘤细胞侵袭和迁移能力.
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YB1在肿瘤发生发展中的作用研究进展
YB1是一种多功能蛋白,广泛参与细胞进程.既往大量研究发现,肿瘤中YB1表达明显升高,其高表达与肿瘤的不良预后和复发密切相关.近几年,针对YB1影响肿瘤增殖、凋亡、侵袭和化疗耐受等生物学功能的潜在机制研究层出不穷,同时,其对肿瘤干细胞及炎性反应等方面调控作用的研究也逐渐深入.本文就YB1在肿瘤发生发展中的作用研究进展进行综述.
