首页 > 文献资料
-
前列腺增生间质对上皮细胞组织激肽释放酶7表达的影响
目的:研究前列腺增生间质细胞对上皮细胞组织激肽释放酶7(KLK7)表达的影响.方法:分离良性前列腺增生(BPH)组织的间质细胞与上皮细胞,经细胞形态学及化学发光微粒子免疫分析(CMIA)方法证实后,构建上皮/间质细胞共培养模型;分别提取单独、共培养条件下上皮细胞的mRNA与蛋白;RT-PCR检测KLK7mRNA表达变化,Western印迹检测KLK7基因编码蛋白(hK7)表达的改变.结果:细胞形态学、CMIA结果显示成功分离上皮与间质细胞,并构建前列腺间质/上皮细胞共培养模型;RT-PCR检测发现,KLK7基因mRNA的表达在有间质细胞共培养的上皮细胞中均高于单独培养的上皮细胞.KLK7/GAPDH的灰度比值分别为1.41±0.04、1.78±0.10,具有显著差异(P<0.01);Western印迹与RT-PCR结果一致.结论:前列腺增生间质细胞抑制上皮细胞KLK7基因表达,KLK7可能是前列腺上皮细胞应对间质细胞调控的一种效应物质.
关键词： 良性前列腺增生 间质/上皮细胞共培养模型 组织激肽释放酶7 -
MicroRNA-143对白介素13诱导的人角质形成细胞组织激肽释放酶7表达的影响
目的 探讨microRNA-143 (miR-143)对白介素13(IL-13)诱导的人角质形成细胞组织激肽释放酶7(KLK7)表达的影响.方法 取对数生长期人皮肤原代角质形成细胞(NHEK),分别用0、2、10、50 μg/L IL-13处理24 h,或用50 μg/L IL-13分别处理0、6、12、24、48 h后,收集细胞,提取细胞总RNA,实时荧光定量PCR检测KLK7基因mRNA水平.再取部分NHEK,分为4组,即NHEK组(空白对照组,既不转染也不用IL-13刺激)、IL-13组(仅用50 μg/L IL-13处理)、miR-NC组(转染microRNA mimics阴性对照后用50 μg/L IL-13处理)和miR-143组(转染miR-143 mimics后用50 μg/LIL-13处理),IL-13处理24 h后,实时荧光定量PCR检测各组中KLK7 mRNA的相对表达水平,Western免疫印迹检测KLK7蛋白表达水平.结果 0、2、10、50 μg/L IL-13处理NHEK 24h后,KLK7 mRNA的相对表达水平分别为1.00±0.12、0.89±0.04、1.15±0.09和1.70±0.10,随着IL-13浓度的升高,KLK7mRNA相对表达水平有上升趋势(F=92.48,P＜0.05).50 μg/L IL-13分别处理NHEK 0、6、12、24、48 h后,KLK7 mRNA相对表达水平分别为1.00±0.05、1.05±0.12、1.71±0.20、1.97±0.19和2.48±0.13,随着IL-13处理时间延长,KLK7 mRNA的相对表达水平有上升趋势(F=206.44,P＜0.05).与miR-NC组KLK7的mRNA和蛋白相对表达水平相比,miR-143组均降低,差异有统计学意义(t值分别为6.76、4.23,均P＜0.05).结论 在人角质形成细胞中,IL-13上调KLK7的表达可能与miR-143的调控相关.
