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自身猝灭探针文献资料
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自身猝灭探针定量PCR检测HCV方法的建立
目的 建立自身猝灭荧光探针定量PCR技术检测HCV方法.方法 构建重组质粒pMD18-T-HCV5'NCR作为标准品,并通过Sigma在线软件设计自身猝灭探针,优化定量PCR体系,并进行方法学评价.结果 建立了自身猝灭荧光探针的定量PCR方法,线性为101～1010copies/μl;灵敏度达50 copies/μl;批内CV为6.1%,批间CV为6.5%,日间CV为6.8%;特异性为100%,与其他肝炎病毒无交叉反应.与紫外定量方法比较,结果差异无显著性,且高度相关.结论 以自身猝灭荧光探针建立的HCV荧光定量PCR检测方法,灵敏度高、特异性强,为新型试剂盒的开发奠定了基础.
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淋病奈瑟菌自身猝灭荧光定量PCR方法的临床应用
目的 评价自身猝灭荧光定量PCR(FQ-PCR)检测临床标本中淋病奈瑟菌的应用价值.方法 应用培养法和FQ-PCR法分别检测59份疑为淋病奈瑟菌感染病人的分泌物标本.结果 两者特异性均为100%(28/28),而FQ-PCR敏感性100%(38/38),高于培养法81.6%(31/38)(P＜0.05).对其中32例经正规治疗,症状、体征消失2～3周的患者进行追踪检测,培养法均转阴,FQ-PCR检测仍有5例为阳性.结论 自身猝灭荧光定量PCR方法具有快捷、敏感、特异、价格低廉和稳定性较好的特点,是辅助诊断淋病的有效方法之一.
