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抑癌基因PTEN提高耐药食管癌化疗敏感性的作用及其机制研究
目的 研究抑癌基因10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源基因(PTEN)对耐顺铂食管癌细胞Ec9706/cDDP化疗敏感性的影响及其机制.方法 建立耐药的食管癌细胞株Ec9706/cDDP,脂质体转染PTEN质粒及其功能缺陷的突变质粒PEGFP-C1-G129E和PEGFP-C1-C124S,Wst-1检测食管癌细胞Ec9706/cDDP在含顺铂培养基中的增殖情况,克隆形成实验检测其增殖能力,流式细胞术检测其凋亡,荧光定量聚合酶链反应(Q-PCR)检测多重耐药基因1(MDR1) mRNA的表达水平.结果 与完全空白组、转染空质粒组、PEGFP-C1-G129E组和PEGFP-C1-C124S组相比,转染PTEN的Ec9706/cDDP细胞增殖明显减少(P＜0.01);转染PTEN组Ec9706/cDDP克隆形成率减少;转染PTEN使得Ec9706/cDDP凋亡增加(P均＜0.01);Q-PCR结果显示,PTEN明显抑制MDR1 mRNA水平的表达(P均＜0.01),并且这种抑制作用依赖于129和124这两个位点.结论 PTEN可促进耐药食管癌细胞的化疗敏感性,并通过抑制MDR1基因的表达水平促进肿瘤细胞对顺铂的敏感性.
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氟康唑耐药白色念珠菌upc2基因转录对mdr1转录的影响
目的 探讨氟康唑耐药白色念珠菌upc2基因转录对mdr1转录的影响.方法 采用常规真菌分离鉴定法分离鉴定46株白色念珠菌,纸片扩散法测定其对5种唑类药物的敏感性,微量稀释法测定氟康唑的低抑菌浓度(MIC),依据氟康唑MIC值将白色念珠菌分为三组(氟康唑敏感株、剂量依赖敏感株、耐药株).应用实时荧光定量PCR检测各组白色念珠菌mdr1基因转录水平和ups2基因转录水平.采用Pearson相关分析mdr1基因转录水平和ups2基因转录水平之间的关系.结果 耐药组白色念珠菌的upc2以及mdr1基因转录的相对倍数分别为(5.46±2.34)和(4.51±2.53),均高于敏感组白色念珠菌的(1.07±0.10)和(1.00±0.00),也高于剂量依赖敏感组白色念珠菌的(1.57±0.41)和(1.06±0.12),差异均有统计学意义(P<0.05);耐药组白色念珠菌的mdr1基因转录水平与upc2基因转录水平之间呈正相关(r=0.76,P<0.01).结论 白色念珠菌通过上调upc2基因转录水平而促进mdr1基因转录,进而导致白色念珠菌对氟康唑耐药.
