首页 > 文献资料
-
镉对体外培养成骨细胞增殖、凋亡、分化及矿化的影响
目的 探讨镉对体外培养成骨细胞(osteoblast,OB)增殖、凋亡、分化及矿化的影响.方法 用混合酶消化法分离大鼠颅盖骨成骨细胞,进行原代培养;成骨细胞与不同浓度的Cd2+作用后,MTT法测定细胞增殖;AO/EB双染法进行凋亡形态学观察;PNPP法检测碱性磷酸酶活性;矿化结节计数和面积测量分析镉对成骨细胞矿化能力的影响.结果 各剂量组氯化镉均可抑制成骨细胞增殖,其中2.0 μmol/L以上剂量组与对照组相比差异有统计学显著意义(P＜0.01);16.0 μmol/L、32.0 μmol/L剂量组OB可见较多凋亡细胞;各时点、各剂量组氯化镉均能抑制ALP活性,尤其是48h以上影响作用更明显(P＜0.01);0.5 μmol/L、1.0 μmol/L浓度的氯化镉可明显抑制成骨细胞矿化能力.结论 镉离子可以抑制成骨细胞增殖、分化及矿化能力,促进成骨细胞凋亡,对成骨细胞的骨形成能力有明显抑制作用.
-
去甲斑蝥素通过JAK-STAT3途径诱导结肠癌LS-174T细胞凋亡
目的 探讨去甲斑蝥素(NCTD)诱导结肠癌LS-174T细胞的凋亡效应及其可能分子机制.方法 应用MTT法检测NCTD对细胞生长的抑制作用,通过AO/EB染色、透射电子显微镜观察细胞形态及超微结构的变化,AnnexinV/PI染色检测细胞凋亡率,Western blot检测stat3、survivin、Mcl-1、bax蛋白的表达情况.结果 去甲斑蝥素对结肠癌LS-174T细胞具有显著的生长抑制作用,并呈时间一剂量依赖性;40 μg/ml作用72 h时达到大抑制率(72.4±3.1)％;AO/EB染色及流式细胞术显示,随着NCTD浓度的增加,细胞凋亡率明显增加;透射电子显微镜观察发现,结肠癌LS-174T细胞出现明显凋亡超微结构变化;Western blot结果显示,stat3、survivin、Mcl-1表达明显下降,bax表达明显上升.结论 去甲斑蝥素可以抑制结肠癌LS-174T细胞的生长并促进其凋亡,机制可能是通过抑制stat3途径实现的.
关键词： 去甲斑蝥素 AO/EB AnnexinV/PI survivin STAT3 -
全脑缺血再灌注后神经元凋亡的时相和分布特征
目的探讨大鼠全脑缺血再灌注后神经元凋亡的时相和分布特征,为神经元损伤的早期干预和继发性脑损害的防治提供实验依据.方法建立大鼠全脑缺血模型,采用TTC染色、原位细胞凋亡检测(原位末端标记法,TUNEL)及AO/EB荧光比色法观察脑缺血再灌后海马、皮层凋亡发生的数量和分布,用荧光指示剂Fura-2 AM标记,检测脑海马细胞内游离钙的浓度.结果 TUNEL显示再灌注3 h海马部位即出现散在凋亡细胞,并向皮层区域扩展,24～48 h达高峰;坏死细胞迟于凋亡出现,弥散分布于凋亡细胞周围,再灌注48 h后坏死细胞增多,72 h多.AO/EB法显示海马、额叶和顶叶凋亡细胞总数分布在再灌注后24 h和72 h达高峰,并显著高于对照组(P＜0.05).TTC染色证实全脑缺血再灌注后不出现梗死灶,而是在海马及大脑皮层有弥散性坏死.胞内[Ca2+]i各时间点与对照相比匀显著升高(P＜0.01).结论全脑缺血再灌后受累神经元经历了由凋亡到死亡的过程,对缺血敏感的海马神经元首先受损,并向顶叶和额叶皮层扩展,细胞质内[Ca2+]i增加是主要原因.利用凋亡时间窗进行早期干预可能有益于保护和挽救凋亡前期神经元,减小继发性损害的严重程度.
