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CD8+T细胞依赖的急性移植物抗宿主病小鼠模型的建立
目的 建立CD8+T细胞依赖的急性移植物抗宿主病(GVHD)小鼠模型.方法 分别以主要组织相容性抗原(MHC)相同,而次要组织相容性抗原(miHAs)不同的8～12周龄C3H.SW(H-2Db,CD45.2+)和B6/SJL(H-2Db,CD45.1+)雌性小鼠为供受体,从供体骨髓分离去除T细胞的骨髓细胞(TBM),与其脾脏和淋巴结来源的CD8+T细胞混合,经尾静脉输注给受致死剂量137γ照射的受体鼠.观察移植后受体的体重、毛色、皮肤和生存率的变化,并用流式细胞术(FACS)和组织病理学进一步分析受鼠靶器官细胞浸润和损伤状况.结果 移植后受体鼠出现体重明显减轻、毛发脱落、皮肤溃疡等表现,并在28d后出现死亡;FACS证实浸润受鼠骨髓、脾脏和肝脏的细胞主要为CD45.2+的供鼠细胞,实验组中还有大量CD45.2+CD8+T细胞浸润;组织病理学发现肝脏中大量淋巴细胞浸润,皮肤结构破坏,组织坏死.结论 成功建立了miHAs不匹配的异基因骨髓移植诱导的CD8+T细胞依赖的GVHD动物模型,该模型模拟了目前临床病人采用的同种异基因骨髓移植配型方式,可为异基因骨髓移植GVHD发病机理及该病的防治研究提供良好的实验平台和工具.
关键词： CD8+T cell 移植物抗宿主病(GVHD) 动物模型 -
人子宫颈癌PD-L1的表达及其与肿瘤内浸润T细胞的相关性研究
目的 观察负性免疫调节分子程序性死亡配体1(programmed death receptor-ligand 1,PD-L1)在人子宫颈癌的表达及其与肿瘤内T淋巴细胞浸润的关系.方法 免疫组织化学染色观察5例正常宫颈组织、7例高级别宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CINⅡ-Ⅲ)组织和67例子宫颈癌组织中PD-L1的表达和淋巴细胞PD-1的表达,免疫荧光染色观察相应组织内浸润的CD4+T和CD8+T细胞数量,TUNEL法检测淋巴细胞凋亡.结果 正常子宫颈上皮不表达PD-L1;宫颈瘤变上皮不表达或弱阳性表达PD-L1,70%(47/67)的宫颈癌表达PD-L1.肿瘤内浸润的部分淋巴细胞表达PD-1.子宫颈瘤变上皮与子宫颈鳞状细胞癌PD-L1表达存在明显差异(P<0.01),浅表浸润的子宫颈鳞状细胞癌PD-L1 的表达略低于深部浸润的鳞状细胞癌,但无显著差异;PD-L1阳性病例肿瘤局部CD8+T细胞数量显著减少,且PD-L1 表达与CD8+T细胞数量明显负相关(r=-0.82,P<0.01),但与肿瘤局部CD4+T细胞数量无明显相关性(r=-0.05,P>0.05);部分PD-L1阳性的子宫颈癌局部浸润的淋巴细胞存在凋亡现象.结论 子宫颈癌细胞表达PD-L1,且PD-L1的表达与肿瘤局部浸润的CD8+T细胞数量减少有关,但与浸润的CD4+T细胞数量无关.癌细胞表达PD-L1可能促进了肿瘤内浸润的淋巴细胞凋亡.
关键词： 子宫颈癌 PD-L1 CD4+T cell CD8+T cell 凋亡
