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siRNA干扰ski基因的表达对人肝癌HepG2细胞生物学功能的影响
目的:设计并化学合成针对原癌基因ski的siRNA分子片段,转染人肝癌HepG2细胞,观察其对HepG2细胞增殖、细胞周期和凋亡等生物学功能方面的影响.方法:设计并化学合成针对原癌基因ski的3个siRNA分子序列,阳离子脂质体法瞬间转染HepG2细胞,运用实时定量PCR法和Western印迹法检测细胞中ski基因在mRNA水平和蛋白水平的变化.然后利用MTT法和流式细胞术检测转染ski-siRNA的HepG2细胞增殖、细胞周期和凋亡等生物学功能方面指标的变化.结果:3对特异性ski-siRNA均有效地抑制了ski基因的表达,以siRNA-B抑制效果好,可达到70%,而且随着转染时间的延长,ski的表达呈逐步下降趋势.转染ski-siRNA后HepG2细胞的增殖能力明显受到抑制(P<0.05),S期细胞明显减少,是阴性对照组的2倍以上.结论:靶向ski基因的siRNA分子片段可以有效地抑制人肝癌HepG2细胞的生长,使进入S期的细胞明显减少,其作用与下调ski基因的表达有关,ski可能是肝癌治疗的一个潜在靶点.
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鱼腥草及三丫苦对甲型流感病毒NPAG表达的影响
目的：探讨鱼腥草及三丫苦对甲型流感病毒（nucleo protein antigen，NPAG）表达的影响，了解鱼腥草及三丫苦抗甲型流感病毒的分子机制。方法以胶体金法测定NPAG的表达。瞬间转染，实验分为：Hela细胞组、空质粒组[PCDNA3.1(+)/empty]、重组质粒组[PCDNA3.1(+)/NP)]、脂质体组、三丫苦醇提物组和鱼腥草油组。药物实验加入重组质粒同时将药物加入培养细胞孔中进行干预。转染48h后，测定其上清液NPAG的表达。结果胶体金法测试显示：Hela细胞组、PCDNA3.1(+)/empty组、脂质体组、鱼腥草油组为阴性；PCDNA3.1(+)/NP组、三丫苦醇提物为阳性，NPAG浓度1：64。结论鱼腥草油组可抑制甲型流感病毒NPAG的表达，能抗甲型流感病毒。三丫苦醇提物组不影响NPAG的表达。
