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CopineⅦ文献资料
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siRNA沉默CPNE7基因表达抑制人牙周膜细胞的增殖及骨向分化
目的:探讨沉默CopineⅦ(CPNE7 siRNA)对人牙周膜细胞(human periodontal ligament cells,hPDLs)增殖及骨向分化的作用及其可能机制.方法:体外分离培养hPDLs,采用脂质体转染法将沉默CPNE7的质粒pSUPER-CPNE7转染至hPDLs.采用RT-PCR和Western印迹法检测CPNE7的表达,ELISA检测CPNE7 siRNA对NF-κB活性的作用.给予10 μmol/L NF-κB抑制剂吡咯烷二硫代甲酸铵盐(pyrrolidinedithiocarbamic acid ammonium salt,PDTC)预处理hPDLs 30 min,采用CCK8检测CPNE7对细胞增殖的影响,ELISA检测碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性,RT-PCR和Western印迹法检测RUNX2、OSX和OCN的表达.采用SPSS11.0软件包对数据进行统计学分析.结果:hPDLs经转染pSUPER-CPNE7,CPNE7表达下调,有显著性差异(P＜0.05).CPNE7 siRNA显著增强NF-κB的活性.与对照组(CON)相比,CPNE7 siRNA显著抑制hPDLs增殖,下调ALP活性及RUNX2、OSX和OCN的表达,给予PDTC促进hPDLs增殖,增强ALP活性并上调RUNX2、OSX和OCN的表达.结论:CPNE7 siRNA通过NF-κB通路抑制hPDLs增殖和骨向分化.
