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Layilin的RNAi对透明质酸诱导人肺腺癌A549细胞体外增殖的影响
目的:研究RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术抑制透明质酸受体layilin表达,对透明质酸(hyaluronan,HA)诱导人肺腺癌A549细胞体外增殖的影响.方法:构建能表达针对layilin的短发夹RNA(shRNA)的阳性RNA干扰(positive RNAi,Pi)质粒和表达不针对任何已知mRNA的shRNA的阴性RNAi(negattve RNAi,Ni)质粒,分别转染至A549细胞,以RT-PCR和Western blot检测A549细胞转染前后layilin表达,并用新霉素抗性筛选得到layilin表达受抑制的阳性RNAi(Pi)细胞和layilin表达未受影响的阴性RNAi(Ni)细胞.分别在存在或不存在外源性透明质酸的培养条件下,以MTT实验和软琼脂细胞集落形成实验比较正常(control,C)、Pi、Ni组细胞体外增殖能力.结果:在不存在外源性透明质酸的培养条件下,C、Pi、Ni组A549细胞体外增殖能力无显著差异(P>0.05),在存在外源性透明质酸的培养条件下,Pi和C组相比,体外增殖能力显著降低(P<0.01),Ni和C组相比,体外增殖能力无显著差异(P>0.05).结论:抑制layilin表达能抑制透明质酸诱导人肺腺癌A549细胞体外增殖.
关键词: 肺肿瘤 腺癌 RNA干扰 透明质酸 Layilin A549细胞