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lncRNA SNHG16在结直肠癌组织和细胞中表达及其调控结肠癌细胞中GPAM表达的机制
目的:探讨长链非编码RNA (long non-coding RNA,lncRNA) SNHG 16在结直肠癌(colorectal cancer,CRC)组织和细胞中的表达及其通过海绵吸附miR-128-3p调控结肠癌细胞线粒体甘油3磷酸酰基转移酶基因(mitochondrial glycerol-3-phosphate acyltransferase,GPAM)表达的分子机制.方法:收集2014年1月至2017年1月甘肃省人民医院肛肠科手术切除的60例CRC患者的癌及癌旁组织标本,以及结直肠癌细胞系SW480、SW620、HCT116、Caco-2、DLD-1、HT29和结肠上皮细胞CCD841,用qPCR法检测CRC组织和细胞系中SNHG 16的表达,分析SNHG 16表达与CRC患者临床病例特征的关系.分别用miR-128-3p模拟物、miR-128-3p抑制剂、SNHG 16敲降载体转染SW480细胞后,用qPCR法检测细胞中miR-128-3p及SNHG16 mRNA的表达,用Western blotting法检测GPAM蛋白的表达,用CCK-8法、克隆形成实验及细胞凋亡实验、Transwell小室法检测细胞的增殖、凋亡及侵袭.用双荧光素酶报告基因法和RNA免疫共沉淀实验验证SNHG16和miR-128-3pmRNA靶向结合.构建小鼠SW480细胞移植瘤模型,观察敲降SNHG 16对移植瘤生长的影响.结果:CRC组织及细胞系中SNHG 16高表达(均P＜0.01),其表达水平与CRC淋巴结转移、Duke's分期及患者生存期相关(均P＜0.01).敲降SNHG16可显著抑制SW480细胞的增殖及侵袭能力,并诱导细胞凋亡(均P＜0.01);敲降SNHG 16后小鼠移植瘤瘤体显著小于对照组(P＜0.05).双荧光素酶报告基因检测及RNA免疫沉淀反应结果显示,miR-128-3p与SNHG16相互作用,且在CRC患者中miR-128-3p与SNHG 16负相关(P＜0.01).SNHG16通过内源性竞争海绵吸附miR-128-3p影响其下游靶基因GPAM的表达.结论:SNHG 16在CRC细胞中可通过海绵吸附miR-128-3p调控GPAM表达,SNHG16及miR-128-3p可作为CRC诊断及治疗的潜在靶点.
