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中国大陆两种东毕吸虫rDNA-LSU基因的序列分析
目的测定程氏东毕吸虫、土耳其斯坦东毕吸虫结节变种rDNA-LSU基因序列,并对照已发表的土耳其斯坦东毕吸虫同一基因序列,比较三者的差异,探讨东毕吸虫虫种分类问题.方法收集两虫种成虫,GNT-K法抽提基因组DNA,PCR扩增目的基因,并将其产物克隆人质粒再次扩增,提取质粒DNA,以M13(F/R)作为测序引物进行测序.从GenBank获得土耳其斯坦东毕吸虫rDNA-LSU基因序列,用BioEdit软件将3种血吸虫基因序列排序并比较分析.结果程氏东毕吸虫、土耳其斯坦东毕吸虫结节变种的LSU序列完全一致,与土耳其斯坦东毕吸虫rDNA-LSU基因序列仅相差一个碱基,同源性高达99.99%.结论γDNA-LSU基因序列分析结果不支持程氏东毕吸虫为独立种,土耳其斯坦东毕吸虫结节变种可能是土耳其斯坦东毕吸虫的同种异名.
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绒山羊和绵羊源东毕吸虫ITS rDNA的PCR扩增及序列分析
目的 扩增绒山羊和绵羊源东毕吸虫的ITS rDNA序列并进行分析比较.方法 运用PCR方法,以保守引物BD1和BD2扩增从黑龙江绒山羊和绵羊体内分离的东毕吸虫(Orientobilharzia spp.)rDNA的内转录间隔区(ITS-1及ITS-2).PCR产物经测序后进行序列分析.结果 黑龙江绒山羊和绵羊东毕吸虫的ITS序列总长均为875 bp,其中ITS-1序列长为384 bp,5.8S序列长为159 bp,ITS-2序列长为332 bp.黑龙江绒山羊和绵羊东毕吸虫的ITS序列相似性为99.9%,只有一个碱基差异,存在于ITS-2序列中.结论 本研究在国际上首次报道了绒山羊和绵羊东毕吸虫的ITS序列,证实绒山羊和绵羊源东毕吸虫代表同一个种.这些结果为东毕吸虫分子生物学的进一步研究奠定了基础,并为寄生虫分子系统学研究提供了新资料.
