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河南省输入性恶性疟原虫多药抗性基因1和K13基因的突变分析
目的 对河南省2013-2015年输入性恶性疟原虫多药抗性基因1(Pfmdr1)和K13基因进行检测,分析其基因突变情况.方法 采集河南省2013-2015年自非洲返乡的被确诊为输入性恶性疟患者的血样,并收集病例的相关信息.提取患者血样中疟原虫基因组DNA,巢式PCR扩增Pfmdr1和K13基因,对扩增序列进行测序、比对,分析基因的突变情况.结果 386例输入性恶性疟患者以男性青壮年为主,自26个非洲国家返乡,其中病例数居前3位的输入来源国为安哥拉、赤道几内亚和尼日利亚,其病例数分别占总病例数的22.5％ (87/386)、13.7％ (53/386)和13.2％ (51/386).386份血样均成功扩增出Pfmdr1和K13基因.测序结果显示,Pfmdr1的86和1246位点的突变率分别为23.6％ (91/386)和3.1％ (12/386),K13基因的突变率为5.4％ (21/386).21份K13基因突变的血样来自于安哥拉、赤道几内亚和尼日利亚等10个国家,未发现C580Y突变.在来自安哥拉和赤道几内亚的血样中检测到2个与青蒿素抗性相关的突变,分别为R539T和P574L,突变率均为0.3％ (1/386).2013-2015年,Pfmdr1的86位点的突变率分别为28.8％ (36/125)、23.4％ (32/137)和18.6％(23/124),各年份突变率的差异有统计学意义(x2=6.438,P＜0.05);1246位点突变率分别为4.0％(5/125)、3.7％ (5/137)和1.6％(2/124),各年份突变率的差异无统计学意义(x2=1.384,P＞0.05);K13基因的突变率分别为3.2％ (4/125)、8.8％ (12/137)和4.0％ (5/124),各年份突变率的差异无统计学意义(x2=4.631,P＞0.05).结论 Pfmdr1的86和1246位点的突变率分别为23.6％ (91/386)和3.1％ (12/386),K13基因的突变率为5.4％ (21/386),发现了与青蒿素抗性相关的R539T和P574L位点突变.
关键词： 输入性疟疾 恶性疟原虫 恶性疟原虫多药抗性基因1 K13基因 突变 -
武汉市输入性恶性疟原虫多药抗性基因1相关位点突变分析
目的 了解武汉市输入性恶性疟原虫多药抗性基因1(Plasmodium falciparum multidrug resistance 1,Pfmdr1)相关位点突变情况. 方法 2010-2015年,采集武汉市从非洲和缅甸等疟疾流行区回国人员中确诊为恶性疟的患者血样.根据恶性疟原虫Pfmdr1 86、1042和1246基因位点设计巢式PCR引物,巢式PCR扩增恶性疟原虫Pfmdr1基因,分别用限制性内切酶Apo Ⅰ、Ase Ⅰ和EcoRV酶切扩增产物,分析其86、1042和1246位点的突变率. 结果 共检测恶性疟现症患者血样187份,全部成功扩增出Pfmdr1基因,86、1042和1246位点突变率分别为19.3％ (36/187)、4.3％ (8/187)和9.6％ (18/187).其中非洲输入性疟疾血样175份,86、1042和1246位点突变率分别为20.6％ (36/175)、2.9％ (5/175)和10.3％ (18/175);缅甸输入性疟疾血样12份,其中3例检出1042位点,未检出86位点和1246位点突变. 结论 来自非洲的输入性恶性疟原虫Pfmdr1基因86、1042和1246位点均检出点突变,来自缅甸的输入性恶性疟原虫Pfmdr1基因只检出1042位点发生突变.
关键词： 恶性疟原虫 恶性疟原虫多药抗性基因1 多态性 基因突变
