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不同地区香薷各部位总黄酮及游离黄酮的分析研究
目的 测定不同地区香薷各部位总黄酮和游离黄酮的含有量,找出含黄酮量较高的药材产地和黄酮的主要储存部位.方法 以紫外可见分光光度法(UV-Vis)测定香薷总黄酮,适条件是0.05 mol/L三氯化铝,pH值为5.0的乙酸缓冲液,水浴温度50℃,水浴时间30 min,检测波长420 nm.采用反相高效液相色谱法测定3种主要游离黄酮,色谱柱为Welchrom TM C18(200 mm×4.6 mm,5μm),以0.4％磷酸水溶液(A)-甲醇(B)为流动相,梯度洗脱；体积流量1.0 mL/min；检测波长350 nm；柱温25℃.结果 木犀草素、芹菜素和黄芩素-7-甲醚分别在0.88 ～ 176μg/mL、1.1～219.2 μg/mL和1.55～149.4 μg/mL范围内表现出良好的线性(r＞0.999)；方法的回收率在98.80％ ～102.01％之间,RSD均小于5％,精密度和稳定性良好.以江西和湖北产的香薷总黄酮含有量较高,其全草中总黄酮的质量分数分别为5 955.35 μg/g和4 362.28 μg/g,特别是江西和湖北产香薷花苞中总黄酮的质量分数分别高达13 335.99μg/g和12 936.46 μg/g.结论 不同地区香薷总黄酮含有量由高到低依次为江西、湖北、河南、浙江,不同部位总黄酮的含有量由高到低依次为苞、尖、茎、根.江西产香薷的总黄酮和3种主要游离黄酮的量均较高,且主要集中在茎以上部位.
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RP-HPLC同时测定不同采收期江香薷两种成分的含量
目的:同时测定不同采收期江香薷药材中木犀草素、黄芩素-7-甲醚的含量.方法:采用Angilent Zorbax,Extend C-18(4.6 mm×250 mm,5 μm)色谱柱;以甲醇-0.4%磷酸水溶液(体积比为50:50)为流动相进行等度洗脱,柱温:35℃;流速:1.0 mL/min;检测波长:350 nm.结果:木犀草素、黄芩素-7-甲醚分别在0.04～0.61 μg、0.20～3.01 μg范围内线性关系良好,相关系数均为0.999 9.药材提取方法的平均回收率分别为99.54%、98.60%,精密度、稳定性及重复性均良好.不同采收期江香薷药材中木犀草素和黄芩素-7-甲醚含量有较大差异,以8月份药材中木犀草素和黄芩素-7-甲醚含量高,分别为264.8μg/g、2 746.3μg/g.结论:所建立的方法灵敏快速,操作简便,重现性好,可用于江香薷药材的质量控制.
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黄芩素-7-甲醚对缺氧致PC12细胞损伤的保护作用
目的 研究黄芩素-7-甲醚对缺氧PC12细胞的保护作用.方法 将PC12细胞分为正常对照组、缺氧模型组、芦丁组和黄芩素-7-甲醚组,培养24 h后,MTT法检测黄芩素-7-甲醚对细胞活力的影响;酶标仪法检测细胞培养上清液中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)活性以及细胞内丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxidedismutase,SOD)和过氧化氢酶(catalase,CAT)水平;2',7’-二氯荧光素探针法检测细胞内活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)水平;实时荧光定量PCR和Westemblot检测核因子E2相关因子2(Nrf2)和血红素氧合酶-1 (heme oxygenase-1,HO-1)的mRNA和蛋白的表达.结果 与正常对照组相比,缺氧导致PC12细胞活力显著降低,LDH、MDA和ROS水平显著升高,抗氧化酶SOD和CAT的活力显著降低.黄芩素-7-甲醚预处理能够逆转这些变化.此外,缺氧能够诱导细胞内Nrf2、HO-1的mRNA和蛋白表达增加,而黄芩素-7-甲醚能够进一步提高Nrf2、HO-1的mRNA和蛋白表达.结论 黄芩素-7-甲醚对缺氧致PC12细胞损伤有一定的保护作用,其作用机制可能与激活Nrf2/HO-1通路,抑制氧化应激损伤有关.
