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D-AP5对氟砷联合染毒原代培养海马神经元突触相关蛋白表达的影响
[目的]探讨谷氨酸NMDA受体拮抗剂D-2-氨基-5-磷酰基戊酸(D-AP5)对氟砷联合染毒后原代海马神经元突触相关蛋白表达的影响.[方法]将体外培养的海马神经元分为4组,空白对照组、氟砷联合染毒组(0.4 μg/mL氟化钠+0.1μg/mL亚砷酸钠)、D-AP5组(25.tmol/L D-AP5)和D-AP5+氟砷联合染毒组(0.4 μg/mL氟化钠+0.1.tg/mL亚砷酸钠+25 μmol/LD-AP5).各组海马神经元置于37℃、含有体积分数5％CO2培养箱中培养24h.把培养好的各组海马神经元用CCK8检测活性,用蛋白免疫印迹法检测海马神经元中NR2B、SYN及GAP43突触相关蛋白的表达水平.[结果]与空白对照组[(100.00±0.00)％]比较,氟砷联合染毒组[(75.81±6.27)％]、D-AP5+氟砷联合染毒组[(81.58±5.20)％]的细胞存活率均明显降低(P＜0.05);与氟砷联合染毒组[(75.81±6.27)％]比较,D-AP5组[(98.78±3.53)％]、D-AP5+氟砷联合染毒组[(81.58±5.20)％]海马神经元存活率均明显升高(P＜0.05).氟砷联合染毒组(0.425±0.06)、D-AP5组(0.469±0.03)、D-AP5+氟砷联合染毒组(0.354±0.04)的NR2B相对表达量较空白对照组(0.572±0.05)均有所下降(P＜0.05),D-AP5+氟砷联合染毒组(0.354±0.04)受体蛋白NR2B表达较氟砷联合染毒组(0.425±0.06)降低(P＜0.05);氟砷联合染毒组与D-AP5+氟砷联合染毒组的SYN和GAP43相对表达量均较空白对照组低(P＜0.05).而D-AP5组与D-AP5+氟砷联合染毒组的SYN和GAP43表达较氟砷联合染毒组均升高(P＜0.05).[结论]氟砷联合染毒能够下调突触相关蛋白SYN及GAP43表达水平,谷氨酸NMDA受体拮抗剂D-AP5可以抑制氟砷联合染毒对海马神经元突触相关蛋白表达的影响.
