首页 > 文献资料
-
7-二氟亚甲基-5,4'-二甲氧基染料木黄酮对大鼠压力性尿失禁模型肛提肌细胞增殖与凋亡的影响
目的 研究7-二氟亚甲基-5,4'-二甲氧基染料木黄酮(DFMG)对压力性尿失禁(SUI)Wistar大鼠模型肛提肌细胞增殖与凋亡的影响.方法 采用模拟产伤及卵巢切除的方法建立SUI Wistar大鼠模型,检测漏尿点压力和腹部漏尿点压力,HE和Masson染色观察肛提肌组织.分离并培养大鼠肛提肌细胞,实验组分为正常对照组、SUI组、SUI+DFMG(2、4、8μmol·L-1)处理组.MTT和FCM分别检测细胞增殖和凋亡;western blot检测c-myc、Fas、caspase-8、bcl-2、bax、cyto-c和caspase-9.结果 与对照组比较,SUI组肛提肌细胞增殖率下降,凋亡率升高,bcl-2表达下调,c-myc、Fas、caspase-8、bax、cyto-c、caspase-9表达上调;用DFMG处理SUI大鼠模型肛提肌细胞后,细胞增殖率升高,凋亡率下降,bcl-2表达升高,c-myc、Fas、caspase-8、bax、cyto-c、caspase-9表达减少.结论 DFMG可抑制SUI大鼠模型肛提肌细胞凋亡,促进细胞增殖,其机制可能与其上调bcl-2、下调c-myc、Fas、caspase-8、bax、cyto-c、caspase-9表达有关.
关键词： 压力性尿失禁 肛提肌细胞 7-二氟亚甲基-5 4'-二甲氧基染料木黄酮 -
7-二氟亚甲基-5,4'-二甲氧基染料木黄酮通过下调Caspase-3的表达拮抗H2O2诱导的血管内皮细胞凋亡
目的 研究7-二氟亚甲基-5,4'-二甲氧基染料木黄酮对H2O2诱导血管内皮细胞凋亡的影响,并初步探讨其作用机制.方法 用1 mmoL/L H2O2诱导人脐静脉内皮细胞建立氧化应激损伤模型.实验分为空白对照组、H2O2损伤组、溶媒对照组、先导化合物组(100 mol/L染料木黄酮)、不同浓度(0.1、0.3、1、3、10 μmol/L) 7-二氟亚甲基-5,4'-二甲氧基染料木黄酮组.DCFH-DA激活荧光流式细胞术测定活性氧的生成,吖啶橙染色荧光显微镜观察细胞凋亡形态,PI染色流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot测定Caspase-3的表达.结果 1 mmol/LH2O2孵育血管内皮细胞24h,活性氧的生成显著增加,吖啶橙染色荧光显微镜下细胞呈现明显的凋亡形态学改变,细胞凋亡率升高,Caspase-3的表达上调.用7-二氟亚甲基-5,4'-二甲氧基染料木黄酮预处理血管内皮细胞后可见活性氧的生成减少,细胞凋亡率降低,Caspase-3的表达下调.结论 7-二氟亚甲基-5,4'-二甲氧基染料木黄酮对H2O2诱导血管内皮细胞凋亡有明显的抑制作用,其作用机制可能是通过降低活性氧的生成,下调Caspase-3的表达,从而拮抗H2O2诱导的血管内皮细胞凋亡.
-
7-二氟亚甲基-5,4'-二甲氧基染料木黄酮对宫颈癌细胞增殖和凋亡的影响及其机制
目的:检测7-二氟亚甲基-5,4'-二甲氧基染料木黄酮(7-difluoromethoxy-5,4'-dimethoxygenistein,DFMG)对宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响并探讨其可能机制.方法:体外培养宫颈癌HeLa细胞,MTT法检测HeLa细胞的增殖;AO/EB染色检测HeLa细胞凋亡形态学改变;FCM检测HeLa细胞凋亡率;DNA琼脂糖电泳检测HeLa细胞凋亡的DNA条带;RT-PCR和Western印迹检测DFMG对HeLa细胞凋亡相关蛋白表达的影响.结果:DFMG在体外呈浓度(0.25～64 μg/mL)和时间(24～72 h)依赖性抑制HeLa细胞增殖,其作用48 h的IC50值为4.62 μg/mL,HeLa细胞出现典型的凋亡形态学改变,典型的凋亡DNA条带,凋亡率呈浓度依赖性增高,伴随c-myc mRNA和蛋白表达增高,其下游蛋白bax,cyto-c,caspase-9表达增高,而bcl-2蛋白表达降低.用siRNA干扰沉默c-myc基因,能部分抵消DFMG对HeLa细胞增殖抑制和凋亡诱导效应,而用c-myc cDNA转染HeLa细胞,则能协同DFMG对细胞增殖的抑制作用及对凋亡的诱导作用.结论:DFMG在体外具有抑制HeLa细胞增殖和诱导凋亡作用,其机制可能与钝化c-myc基因,启动线粒体凋亡途径有关.
