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槲皮素诱导人食管癌Eca-109细胞发生自噬及其作用的研究
目的 明确槲皮素(quercetin,QUE)处理人食管癌Eca-109细胞后是否发生自噬及自噬在QUE抑制细胞增殖中的作用.方法 用不同剂量(0、12.5、25、37.5和50 μg/mL)QUE处理人食管癌Eca-109细胞24 h后,MTT检测细胞增殖率;激光共聚焦显微镜观察细胞内自噬标志蛋白LC3荧光强度;Western blot分别检测LC3和Beclin-1的表达情况.自噬抑制剂氯喹(chloroquine,CQ)预处理2h后,以不同剂量QUE(0、12.5、25、37.5和50 μg/mL)处理人食管癌Eca-109细胞24h,MTT检测细胞增殖.结果 QUE显著抑制了Eca-109细胞的增殖,并呈剂量效应关系(P＜0.05).与对照组相比,随着QUE剂量的增加,激光共聚焦显微镜观察到在细胞内LC3荧光逐渐增强,LC3和Beclin-1蛋白表达逐渐升高.自噬抑制剂预处理后,MTT结果显示QUE+ CQ组的细胞增殖率明显低于QUE单独处理组(P＜0.05).结论 QUE既可以抑制人食管癌Eca-109细胞增殖,又可以诱导细胞发生保护性自噬.抑制自噬能够增加槲皮素对肿瘤细胞的抑制作用.
关键词： 槲皮素 人食管癌细胞Eca-109 增殖抑制 自噬 -
熊果酸诱导人食管癌细胞Eca-109凋亡的作用及机制
目的 研究熊果酸(Ursolic acid,UA)抑制人食管癌Eca-109细胞增殖、诱导细胞凋亡的作用及机制.方法 MTT比色法检测熊果酸对Eca-109细胞的增殖抑制作用;透射电镜观察经熊果酸处理后Eca-109细胞超微结构的改变;流式细胞术检测细胞周期变化及细胞凋亡率;Western blot法检测P27kip1蛋白、凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达.结果 20～50μmol/L熊果酸对Eca-109细胞具有显著的抑制作用(P<0.01);电镜下,18.32～36.65 μmol/L熊果酸处理过的Eca-109细胞可见典型的凋亡形态及坏死形态;流式细胞检测显示细胞凋亡率及G0/G1期细胞随着熊果酸浓度的增加而增多,S期细胞逐渐减少;Western blot检测结果提示熊果酸能使Bcl-2表达下降而Bax、P27kip1增加.结论 熊果酸对人食管癌细胞系Eca-109具有显著的增殖抑制、诱导细胞凋亡作用.其作用与提高P27kip1蛋白的表达,将细胞阻滞在G0/G1期,下调Bcl-2的表达和增加Bax的表达有关.
关键词： 熊果酸 人食管癌细胞Eca-109 细胞凋亡 流式细胞术 p27kip1
