首页 > 文献资料
-
小窝蛋白－1通过 p38 MAPK 信号链通路对大鼠机械通气所致肺损伤的保护机制研究
目的：研究大鼠肺组织在不同潮气量机械通气的情况下小窝蛋白－1（ Cav－1）及p38 MAPK表达的变化。方法56只雄性健康成年SD大鼠，体质量220～330 g，随机均分为7组，自主呼吸对照组（ A组）：仅做气管切开；不同通气时间保护性机械通气组（ B1组和B2组）：潮气量（ VT ）为6 mL／kg，呼吸频率（ RR）为60次／min，B1组通气1 h，B2组通气2 h；不同通气时间大潮气量组（ C1组和C2组）；不同时间大潮气量＋SB203580组（ D1组和D2组）。 C和D组VT为30 mL／kg，RR为40次／min，C1和D1组通气1 h，C2和D2组通气2 h。机械通气前30 min D组大鼠给予注射SB203580溶液，实验中7组大鼠均给予动脉血气和血流动力学监测。 A组行气管切开即刻处死，剩余各组大鼠于预定时间机械通气结束时处死，光镜下观察肺病理改变，免疫组织化学染色法检测肺组织中Cav －1、p38 MAPK及AP－1蛋白的表达，测定Cav －1、MKK3、p38 MAPK mRNA表达，测定髓过氧化物酶（MPO）活性及肺湿干质量比值（W／D），ELISA法测定支气管肺泡灌洗液（ BALF）中总蛋白及IL－6含量。结果与A组比较，C组Cav－1、p38 MAPK蛋白及Cav－1、p38 MAPK、MKK3 mRNA表达上调，W／D比值、MPO、总蛋白浓度、IL－6含量升高，蛋白激酶（AP）－1蛋白表达下降（P＜0．05）。与B组比较，C组Cav－1、p38 MAPK蛋白及p38 MAPK、Cav－1、MKK3 mRNA表达上调，W／D比值、MPO、总蛋白浓度、IL－6含量升高，AP－1蛋白表达水平下降（ P＜0畅05）。与C组比较，D组p38 MAPK蛋白及p38 MAPK、MKK3 mRNA表达下降，Cav－1、AP－1蛋白及Cav－1 mRNA表达上升，W／D比值、MPO、总蛋白浓度、IL－6含量升高（P＜0．05）。结论 Cav－1及其p38 MAPK信号链在机械通气中表达的上调，参与了机械通气相关性肺损伤的保护作用。
-
抑制小窝蛋白－1磷酸化对机械通气所致肺损伤的保护作用
目的：研究抑制小窝蛋白－1（ Cav－1）磷酸化对机械通气所致肺损伤的效应。方法50只健康雄性SD大鼠随机分为A、B1、B2、C1及C2五组（每组10只）。 A组为正常对照组，仅做气管切开；B1组为1 h大潮气量机械通气组；B2组为2 h大潮气量机械通气组；C1组为1 h大潮气量机械通气＋酪氨酸蛋白激酶抑制剂PP2（5 mg／kg）组；C2组为2 h大潮气量机械通气＋酪氨酸蛋白激酶抑制剂PP2（5 mg／kg）组。 C1和C2组在机械通气前1 h腹腔注射抑制剂。各组大鼠均连续监测平均动脉压（ MAP ）。光镜观察肺组织病理改变，并做弥漫性肺泡损伤系统（ diffuse alveolar damage， DAD）评分，比色法测定髓过氧化物酶（ myeloperoxidase， MPO）活性，计算肺湿／干比（W／D），蛋白印迹检测磷酸化小窝蛋白－1[P －Cav －1（Y14）]和小窝蛋白－1（Cav－1）表达情况，免疫组织化学染色法检测肺组织中内皮型一氧化氮合酶（eNOS）和白细胞介素－1受体相关激酶4（IRAK4）表达情况，酶联免疫吸附试验（ELISA）检测各组大鼠肺泡灌洗液TNF－α水平，伊文思蓝（ Evans blue）法检测肺血管通透性。结果 B1、B2、C1、C2组病理损伤评分、肺湿／干比、Cav－1、eNOS、IRAK4表达量、TNF－α水平、Evans blue渗出量、MPO活性、MAP及血气分析与A组比较差异均有统计学意义（均P＜0．05）；与A组比较，B1、B2、C1组P－Cav－1表达升高（均P＜0.05），而C2组P－Cav－1（Y14）表达量差异无统计学意义（P＞0．05）；C1组与B1组比较，C2组与B2组比较，病理损伤评分、肺湿／干比，P－Cav－1（Y14）、eNOS、IRAK4表达量、TNF－α的水平、Evans blue含量、MPO活性、MAP、及血气分析差异均有统计学意义（均P＜0.05）；C1组与B1组比较，C2组与B2组比较，Cav－1表达量差异无统计学意义（均P＞0．05）。结论抑制Cav－1磷酸化能够降低肺毛细血管通透性，减少炎症因子和炎症细胞的迁移，从而对大鼠机械通气所致肺损伤起到保护作用。
