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小鼠mP24基因的原核表达及多抗制备
目的:本研究是为后续实验中深入研究小鼠mP24基因的功能及活性提供mP24多克隆抗体.方法:mP24是小鼠中新发现的新基因,通过构建了pET-28a(+)/mP24原核表达质粒,转化入大肠杆菌BL21(DE3)中,IPTG诱导宿主细菌表达融合蛋白.经过SDS-PAGE分析,结果表明该蛋白能以可溶性蛋白形式存在.利用镍柱纯化融合蛋白,免疫新西兰兔,制备mP24多抗.结果:Western Blot结果显示,制备的抗小鼠mP24多克隆抗体具有较高的特异性.ELISA实验检测,该多抗时免疫抗原的效价高达1:9000,具有较高的效价.结论:本实验成功制备了mP24的多克隆抗体,为进一步开展mP24基因功能的研究奠定了基础.
关键词: mp24 多克隆抗体 原核表达 Westernblot ELISA