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hMSCs成骨诱导前后免疫调节的实验研究
目的:从免疫学机制方面探讨人骨髓间充质干细胞(Human bone marrow derived mesenchymal stem cell,hMSCs)、成骨诱导后骨髓间充质干细胞(Osteogenic cells differentiated from mesenchymal stem cells,DOC)免疫调节作用的可能机理.方法:hMSCs、DOC(成骨诱导6天、12天、18天),采用流式细胞技术(FACS),分别检测CD40、CD154、CD80、CD86、HLA-Ⅰ、HLA-Ⅱ在诱导前后其表达水平的变化.hMSCs和DOC(诱导18天),分别作混合淋巴细胞反应(CCK-8法),检测不同数量级hMSCs、DOC体外对双向混合淋巴细胞反应体系同种异体PBMCs增殖的影响,以及不同数量级hMSCs、DOC对经植物血凝素(PHA)刺激后同种异体PBMCs增殖的的影响.结果:hMSCs、DOC低水平表达CD40、CD154、CD80、CD86和HLA-Ⅱ,高水平表达HLA-Ⅰ.不同数量级hMSCs、DOC均可不同程度抑制同种异体PBMCs的增殖反应,其抑制效果大体与细胞量成正比,与阳性对照组相比,均有统计学差异(P＜0.01).结论:在体外实验中,hMSCs、DOC可能通过低免疫原性和降低T细胞的免疫应答从而维持其免疫调节功能.
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hMSCs成骨诱导前后分泌免疫相关细胞因子的实验研究
目的:研究hMSCs、DOC(osteogenic cells differentiated from mesenchymal stem cells,成骨诱导后骨髓间充质干细胞)分泌免疫相关细胞因子的变化,从细胞因子角度探讨hMSCs、DOC形成免疫抑制微环境的可能机理.方法:hMSCs、DOC(成骨诱导18天),采用ELISA技术,分别检测IL-2、IL-4、IL-10和TGF-β1分泌水平的变化.结果:在MSCs、DOC中IL-2、IL-4h低表达或忽略表达,IL-10中度表达,TGF-β1高表达.对IL-2、IL-4、IL-10,hMSCs、DOC的表达水平有统计学差异(P＜0.05).结论:在体外实验中,hMSCs、DOC可能形成免疫抑制微环境并通过其维持免疫调节功能.
