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加味当归补血汤对TGFβ1诱导的肾小管上皮细胞JNK1信号转导通路的调控作用
目的:观察加味当归补血汤对转化生长因子β1(TGFβ1)刺激的小鼠肾小管上皮细胞丝裂原活化蛋白激酶信号C-Jun N端激酶1(JNK1)的影响,探讨该方防治肾间质纤维化的部分细胞生物学机制.方法:取原代培养的BALB/C小鼠肾小管上皮细胞,用TGFβ1刺激24小时,不同剂量组加味当归补血汤(中药)及洛汀新含药血清干预.观察各组细胞形态学变化,PT-PCR、Western-Blotting技术检测细胞JNK1 mRNA的和蛋白质表达情况.结果:①TGFβ1刺激后,肾小管上皮细胞部分形态发生变大,伸长,呈梭形,经中药和洛汀新血清干预后,细胞形态又恢复为正常的鹅卵石样形态特征,②模型组肾小管上皮细胞JNK1mRNA和蛋白表达水平显著上调,各浓度中药能显著下调细胞JNK1基因和蛋白表达(P＜0.01～0.05),洛汀新仅能显著下调JNK1蛋白水平,对JNK1 mRNA下调不显著.结论:加味当归补血汤防治肾间质纤维化可能与调控肾小管上皮细胞TGFβ1-JNK1信号转导途径相关.
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川芎嗪对人肾小管上皮细胞SnoN蛋白表达的影响*
目的:观察川芎嗪(TMP)对人肾小管上皮细胞Smad转录共抑制因子SnoN蛋白表达水平的影响.方法:体外培养人肾小管上皮细胞(HK-2),应用MTT法检测不同浓度TMP以及转化生长因子-β1 (TGF -β1)、肝细胞生长因子(HGF)对细胞增殖的影响,应用Western blot法检测细胞裂解液中SnoN蛋白表达水平.结果:与对照组比较,50μg/ml川芎嗪孵育HK-2细胞24小时可显著诱导细胞核中SnoN蛋白的表达,与50ng/ml HGF诱导的SnoN蛋白表达水平没有明显差异(P>0.05),川芎嗪与HGF联合用药后加入TGF-β1共刺激细胞,可明显抑制TGF-β1诱导的SnoN蛋白的降解.结论:川芎嗪可诱导HK-2细胞中SnoN蛋白表达,并且可能在阻断TGF -β1诱导的SnoN蛋白降解方面,与HGF具有协同作用.
关键词： 川芎嗪/药理学 肾小管上皮细胞/药物作用 体外研究 -
川芎嗪对TGF-β1诱导人肾小管上皮细胞转分化抑制作用的实验研究
目的:探讨川芎嗪对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的人肾小管上皮-间充质转分化(EMT)的抑制作用机制.方法:体外正常培养人肾小管上皮细胞(HK-2),以5ng/ml TGF-β1诱导HK-2发生EMT,同时给予50μg/ml川芎嗪干预,应用Western blot法检测细胞裂解液中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)以及磷酸化Smad2(p-Smad2)蛋白表达水平的变化.结果:TGF-β1能显著诱导HK-2细胞的p-Smad2和α-SMA蛋白表达,50μg/ml川芎嗪能显著抑制TGF-β1诱导的HK-2细胞α-SMA、p-Smad2蛋白表达.结论:抑制TGF-β1诱导的p-Smad2、α-SMA蛋白表达可能是川芎嗪抑制HK-2细胞转分化的作用机制.
关键词： 川芎嗪/药理学 肾小管上皮细胞/药物作用 体外研究
