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呼吸道革兰阴性病原菌分布及耐药特性分析
目的:对呼吸道感染革兰阴性病原菌的分布以及耐药特性进行分析.方法:选取呼吸道感染患者对其痰菌进行分离,经过培养共得到革兰阴性杆菌298株,对抗生素敏感性、低抑菌浓度、β-内酰胺酶、超广谱β-内酰胺酶等进行测定,并对结果予以汇总.结果:常见的呼吸道感染革兰阴性病原菌主要有铜绿假单胞菌(39.93%)、鲍曼不动杆菌(3.36%)、大肠埃希菌(13.09%)、克雷伯菌(39.93%)、阴沟肠杆菌(7.72%)、产气肠杆菌(5.70%)等.结论:自呼吸道分离出的革兰阴性杆菌具有十分严重的耐药性,对病原菌的变化以及耐药趋势进行及时的监测对临床来说具有重要的价值.
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熔解曲线分析检测临床常见5种革兰阴性菌的方法建立
目的:构建熔解曲线分析法检测5种临床常见革兰阴性病原菌.方法:选取临床常见的大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯杆菌、鲍曼不动杆菌、嗜麦芽单胞菌作为目标检测菌种.对目标菌种设计种特异性引物.构建熔解曲线法,并进行特异性验证.检测不同拷贝浓度稀释液进行敏感性分析.检测临床分离目标菌各20株,进行稳定性评价.结果:(1)经预实验后,对Tm值差异较大的铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯杆菌、鲍曼不动杆菌三对引物同时进行熔解曲线分析,对大肠埃希菌、嗜麦芽单胞菌两对引物同时进行熔解曲线分析.(2)特异性验证显示,目标菌种均有特异性的熔解曲线,各自的Tm值依次为88.37、86.32、80.86和87.56、86.32℃.(3)可检测到的拷贝浓度稀释液约为3.0 × 103 copies/mL.(4)稳定性评价的结果显示,Tm值变化范围窄小,差异有统计学意义.结论:所构建的熔解曲线法具有较好的特异性、敏感性和稳定性.
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熔解曲线分析检测临床常见3种革兰阴性菌的方法建立
目的 构建熔解曲线分析法同时检测临床常见3种革兰阴性病原菌.方法 选取临床常见的铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯杆菌、鲍曼不动杆菌作为本课题研究的检测菌种.对目标菌种设计种特异性引物.构建熔解曲线法,并进行特异性验证.检测不同拷贝浓度稀释液进行敏感性分析.检测临床分离目标菌各20株,进行稳定性评价.结果 (1)特异性验证结果显示,目标菌种均有特异性熔解曲线,Tm值依次为88.37℃; 86.32℃; 80.86℃; (2)敏感性分析结果显示,3种目标菌可检测到的拷贝浓度稀释液依次为:1.34×103拷贝/ml,3.67×103拷贝/ml,3.01×103拷贝/ml； (3)稳定性评价的结果显示,3种目标菌其平均Tm值依次为88.54±0.662; 86.38±0.727；80.12±0.607.结论 所构建的熔解曲线法具有较好的特异性、敏感性和稳定性；并具有快速、简便、成本低廉的特点,可用于临床样本的检测.
