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破骨细胞蛋白质酪氨酸磷酸酶文献资料
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兔抗破骨细胞蛋白质酪氨酸磷酸酶多克隆抗体的制备和应用
目的:采用已构建的pET28a-△PTP-oc重组质粒纯化重组蛋白,制备兔抗破骨细胞蛋白质酪氨酸磷酸酶(PTP-oc)多克隆抗体并鉴定其性能.方法:将构建的pET28a-△PTP-oc重组质粒转化至BL21 (DE3)中,应用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导重组蛋白表达.表达产物经过Q柱阴阳离子交换和Ni柱亲和层析获得纯化的PTP-oc重组蛋白,将纯化的重组蛋白作为抗原免疫家兔,获得PTP-oc多克隆抗体.采用间接ELISA法检测抗体效价,Western blotting法检测抗体的特异性.结果:成功纯化出PTP-oc重组蛋白.间接ELISA法检测,采用纯化诱导后的重组蛋白免疫家兔获得了兔抗PTP-oc多克隆抗体,多克隆抗体效价达1:32 000以上,Western blotting法检测,所得多克隆抗体有较高的特异性.结论:成功纯化了PTP-oc重组蛋白,制备出PTP-oc多克隆抗体.
关键词： 破骨细胞蛋白质酪氨酸磷酸酶 多克隆抗体 鉴定 破骨细胞 效价
