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pEgr1-TRAIL重组质粒联合电离辐射对乳腺癌MCF-7细胞死亡受体通路相关基因和蛋白表达的影响
目的:将Egr1-TRAIL重组质粒转染人乳腺癌MCF-7细胞且加X线照射,探讨MCF-7细胞中死亡受体通路相关基因和蛋白表达的变化.方法:将MCF-7细胞分为对照组、空质粒组、pEgr1-TRAIL质粒组、4.0Gy X射线组、空质粒+4.0 Gy X射线组和pEgr1-TRAIL+ 4.0 Gy X射线组.Real-time PCR法检测各组MCF-7细胞中DR4、caspase-9和caspase-6 mRNA表达水平;Western blotting法检测各组MCF-7细胞中DR4、caspase-9和caspase-6蛋白相对表达水平.结果:经4.0Gy X射线照射后4h,与对照组比较,各组MCF-7细胞中DR4、caspase-9和easpase-6 mRNA表达水平升高(P＜0.01),8h达高值,之后开始降低,到24 h恢复到照射前水平;各组MCF-7细胞中DR4、caspase-9和caspase-6 mRNA表达由高到低的顺序为pEgr1-TRAIL+4.0Gy X射线组＞空质粒+4.0 Gy X射线组＞pEgr1-TRAIL质粒组＞空质粒组＞4.0 Gy X射线组＞对照组,其中pEgr1-TRAIL+4.0 Gy X射线组MCF-7细胞中DR4、caspase-9和caspase-6 mRNA表达水平明显高于其他各组(P＜0.01).MCF-7细胞中DR4、caspase-9和caspase-6蛋白在照射后6h开始表达,12h达高峰,48 h后细胞中DR4、caspase-9和caspase-6蛋白表达水平仍高于6h时蛋白表达水平.与对照组比较,其他各组MCF-7细胞中蛋白相对表达水平由高到低的顺序为pEgr1-TRAIL+ 4.0 Gy X射线组＞空质粒+4.0 Gy X射线组＞4.0Gy X射线组＞pEgr1-TRAIL质粒组＞空质粒组＞对照组,其中pEgr1-TRAIL+4.0 Gy X射线组MCF-7细胞中蛋白相对表达水平明显高于其他各组.结论:pEgr1-TRAIL重组质粒联合放疗对MCF-7细胞具有杀伤和诱导凋亡的作用,其效果优于单纯质粒或单纯照射.
关键词： pEgr1-TRAIL重组质粒 电离辐射 MCF-7细胞 死亡受体通路
