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PDECGF特异性RNA抑制片段诱导裸鼠膀胱癌细胞凋亡的研究
目的 利用RNA干扰技术在裸鼠膀胱癌动物模型中通过抑制靶向沉默血小板源性内皮生长因子基因(PDECGF)的表达,探讨其在活体动物肿瘤组织中的作用.方法 将psiPDECGF-1及-2稳定转染的阳性T24细胞株及其他对照组直接接种于裸鼠皮下,观察肿瘤细胞生长及成瘤情况、测定肿瘤体积的变化;免疫组化检查PDECGF蛋白表达;TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡.结果 裸鼠体内成瘤实验发现siRNA2组第21天时成瘤率只有50%,而其他各组成瘤率为100%.siRNA2组生长速度明显慢于其他3组,siRNA2组不仅成瘤延迟,且生长速度明显慢于其他3组(P＜0.01).免疫组化证实siRNA2组肿瘤组织PDECGF 蛋白表达低; TUNEL检测siRNA2组细胞凋亡数明显多于其他3组 (P＜0.05).结论 PDECGF siRNA载体稳定转染细胞株体内实验可见膀胱癌细胞成瘤率降低,成瘤延迟及肿瘤生长速度减慢,癌细胞凋亡增多.PDECGF siRNA在裸鼠体内依然对膀胱癌细胞有明显抑制作用.
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PDECGF特异性RNA抑制片段对膀胱癌细胞作用的研究
目的研究siRNA(small interfering RNA)对膀胱癌t24细胞株PDECGF基因表达的抑制作用及对癌细胞增殖和侵袭能力抑制的作用.方法体外合成特异针对人PDECGF基因的siRNA;荧光标记法标记PDECGF siRNA;转入t24细胞株;流式细胞术检测siRNA的转染效率;west-ern blot检测siRNA对PDECGF表达的抑制作用;MTT法检测siRNA对细胞生长增殖抑制作用;Boyden小室法检测siRNA对细胞侵袭能力的影响.结果siRNA转染组PDECGF表达水平明显下降.siRNA转染组细胞生长增殖抑制率随作用时间而增高.siRNA转染组细胞侵袭能力明显低于对照组和空载体组.结论siRNA能特异有效下调PDECGF基因的表达,能有效抑制膀胱癌细胞增殖及侵袭能力.
