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延迟性死亡文献资料
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caspase-3激活在庆大霉素所致耳蜗螺旋神经元延迟性死亡过程中的作用
目的 观察毛细胞丢失后耳蜗神经元延迟性死亡模式以及caspase-3的活动.方法 采用3 mol的庆大霉素作用离体培养的耳蜗24 h,损毁全部毛细胞,分别在毛细胞丢失后1、3、5、7和14 d收获样本.采用Neurofilament 200KDa标记耳蜗神经元,TRITC-labeled phalloidin标记毛细胞,免疫荧光染色观察神经元和毛细胞的存活数量,采用Western Blot的方法检测caspase-3特异降解产物α-spectrin,间接确定caspase-3活动.结果 3 mol庆大霉素作用于培养的耳蜗24 h,耳蜗毛细胞几乎全部消失.螺旋神经元和神经纤维的数目随培养时间的延长而减少,神经元存活从第1天的87%降至第14天的5%.神经元变小且形状不规则,在神经纤维上出现实质小体.检测caspse-3激活的特异降解带-120 KDa的灰度值,发现在毛细胞丢失后24 h,caspase-3活性明显高于毛细胞丢失的初时(P＜0.01).结论 毛细胞丢失引起螺旋神经元死亡具有时间依赖效应,神经元出现凋亡的形态学特征,并且有caspase-3的活动.
