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HSV-Ⅰ降钙素基因相关肽文献资料
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表达降钙素基因相关肽的单纯疱疹病毒Ⅰ型扩增子载体的构建、包装和扩增
目的 对单纯疱疹病毒Ⅰ型扩增子质料装载降钙素基因相关肽,并进行包装和扩增.方法 分别钓取pac 基因和γ134.5基因,克隆入pMD18-T载体中.pSV载体经HindⅢ和BamH Ⅰ双酶切,获得lacZ片段,自身环化形成pUPO-γ134.5-lacZ.合成CGRP基因序列,将此基因替换pUPO-γ134.5-lacZ质粒中的lacZ基因,插入γ134.5基因位点中,即pUPO-△γ134.5-CGRP.再用单纯疱疹病毒温敏株辅助在BHK细胞中包装、扩增,通过检测lacZ的表达反映扩增子病毒滴度.结果 酶切鉴定证实重组子构建成功.重组扩增子质粒的包装、扩增由BHK细胞的形态变化和X-gal原位检测载体lacZ的表达证实.扩增子假型病毒滴度达3.5×105TU/ml.结论 本研究构建、包装、扩增的携带降钙素基因相关肽的假型病毒有较高感染性,这种扩增子病毒可作为实验研究的有力工具.
关键词： HSV-Ⅰ降钙素基因相关肽 基因表达与调控 载体
