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PCR-SSCP银染技术文献资料
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PCR-SSCP银染法在检测错配修复基因突变中的应用
目的建立稳定、有效地检测错配修复(Mismatch Repair,MMR)基因突变的方法.方法对30例肠癌及癌旁正常组织标本分别提取DNA,设计错配修复基因hMSH1引物,应用聚合酶链式反应进行PCR扩增,10%聚丙稀酰胺凝胶电泳PCR产物,银染等技术检测分析错配修复基因hMSH1突变;hMSH1抗体为一抗,免疫组化法检测30例肠癌及例癌旁正常组织石蜡切片中hMSH1蛋白的表达.结果 30例肠癌组织中发生错配修复基因hMSH1突变4例(发生率13.3%),10例癌旁正常组织中无一例发生错配修复基因hMSH1突变;免疫组化检测到30例肠癌组织中有6例hMSH1蛋白表达阴性,其中hMSH1基因突变的组织hMSH1蛋白均未表达,正常组织中hMSH1蛋白表达正常.结论 PCR-SSCP银染法是检测错配修复基因突变的简捷、稳定、有效的方法之一.可成为早期诊断肿瘤发生的分子手段.在肿瘤的早期治疗中具有重要作用.
关键词： PCR-SSCP银染技术 错配修复基因hMSH1突变 肠癌 免疫组化法
